Несущая способность профлиста н60: Профнастил н60 несущая способность

Характеристики, особенности и сферы применения профлиста Н-60

Н-60 — это профнастил, который может быть одновременно и несущим, и кровельным, и фасадным, и даже использоваться для забора. Рассмотрим его технические характеристики, разберёмся, где его лучше всего применять и выделим основные преимущества.

Технические характеристики

Некоторые представляют себе профнастил как простой кусок стали, окрашенный на заводе. Это не совсем так. Профлист Н-60 изготавливают на заводах «Металл Профиль» из целого «пирога» слоёв:

  1. Стальная основа. Её изготавливают методом холодного проката из высококачественного сырья.
  2. Оцинковка. Сталь покрывают слоем цинка, который защищает её от коррозии.
  3. Пассивация. Пассивирующий слой делает коррозионные свойства металлов более пассивными — отсюда и название. Он дополнительно защищает изделие от разрушения.
  4. Грунт.
    В обязательном порядке сталь профнастила Н-60 грунтуют — это нужно, чтобы финишное покрытие лучше держалось. На профессиональном языке это называется «повышение адгезии». Кстати, грунт тоже защищает изделие от коррозии.
  5. Полимер. Завершающий, наружный слой — это полимерное покрытие. Оно может быть разным, но выполняет одинаковые функции: защищает поверхность от механических воздействий, предотвращает выцветание и не позволяет природным явлениям разрушать профнастил.

Причём, такой слоёный «пирог» находится не только на внешней стороне изделия, но и на внутренней. Это позволяет профнастилу Н-60 служить дольше.

Теперь рассмотрим параметры оцинкованного профнастила Н-60:

  • Общая ширина — 902 мм.
  • Полезная ширина — 845 мм.
  • Высота профилирования — 60 мм.
  • Длина профиля — 0,5-12 м.
  • Толщина стали — 0,5-1 мм.

Что касается длины стального профнастила Н-60, то у некоторых производителей клиенты могут заказать нужный им размер листа. Например, в компании «Металл Профиль» прямо на заводе могут изготовить листы в любой длине, начиная от 0,5 метра и заканчивая 12 метрами.

Профиль Н-60 выглядит как чередующиеся трапеции: одна длиннее, другая короче. На длинной (122 мм) присутствует дополнительное ребро жёсткости — оно увеличивает несущую способность изделия. На короткой трапеции (50 мм) ребро жёсткости отсутствует.

Где используется?

Сферы применения стального профнастила Н-60 очень широки. Его можно использовать для

  • Кровли.
  • Фасада.
  • Забора.
  • Несущих конструкций.
  • Несъёмных опалубок.

Н-60 — это единственный профнастил среди несущих, который можно использовать на фасаде или заборе. Но профессиональные строители не рекомендуют этого делать по двум причинам:

  1. Он не слишком изящно смотрится на этих конструкциях из-за большой высоты профиля.
  2. Фасады и заборы почти никогда не испытывают нагрузок, на которые рассчитан профлист Н-60. Для них он избыточен.

Помните: Н-60 — это в первую очередь несущий профнастил. Поэтому лучшее применение он находит для:

  • Несъёмных опалубок железобетонных перекрытий.
  • Обустройства междуэтажных перекрытий без использования монолитного бетона.
  • Плоских крыш гражданского и промышленного назначения.
  • Каркаса жёсткости при возведении зданий каркасного типа.

Преимущества

Благодаря своей относительной лёгкости, заводскому изготовлению, защитным слоям и дополнительным рёбрам жёсткости профнастил Н-60 от компании «Металл Профиль» обладает рядом преимуществ. Рассмотрим их.

  1. Стойкость к коррозии. Полимерное покрытие и другие слои защиты обеспечивают отличную защиту от коррозии.
  2. Широкий выбор цвета. Профнастил Н-60 изготавливают в разных полимерных покрытиях, благодаря чему клиенты могут выбрать десятки сочетаний цвета и поверхности.
  3. Простота установки. Монтаж изделия не вызывает трудностей даже у тех людей, кто нечасто сталкивается со строительством.
  4. Морозоустойчивость. Сталь и полимерное покрытие отлично переносят холод. Они не трескаются на морозе и не теряют своих качественных характеристик.
  5. Устойчивость к выцветанию. Полимерные покрытия от «Металл Профиль» сделаны с расчётом долгого нахождения под солнцем, поэтому они со временем не выцветают.
  6. Пожаробезопасность. Профнастил Н-60 обладает классом горючести «НГ» — это значит, что он не горит. Изделие способно противостоять пожару и даже какое-то время сдерживать его.
  7. Официальная гарантия. Компания «Металл Профиль» даёт гарантию до 40 лет* на изделия собственного производства.
  8. Экономичность. Профнастил не требует дополнительных затрат на окрашивание или покрытие специальными защитными составами.

Резюме

Оцинкованный профнастил Н-60 — это один из тех случаев, когда изделие становится универсальным, хотя изначально изготавливалось для совершенно конкретных целей. Он способен выдерживать большие нагрузки, отлично противостоит коррозии, температурным скачкам и ультрафиолету.

Но помните, что лучше всего он себя проявляет, когда выполняет свои прямые функции — несущие.

*Более подробную информацию о гарантийных сроках можно найти на сайте metallprofil.ru в разделе «Документы».


В статье упоминаются категории:
В статье упоминаются товары:

Несущая способность профнастила: характеристики, справочные величины

Несущая способность – максимально допустимая нагрузка на строительные конструкции, при которой последние не теряют своих свойств, сохраняя деформационную устойчивость.

В зависимости от сферы применения, различают профилированные настилы для покрытий, для перекрытий и для изготовления стеновых ограждений.

Путем профилирования высокопрочной стали придается необходимая жесткость и деформационная стойкость, обеспечивающие высокий уровень несущей способности: чем выше гофр и толще сталь, тем выше уровень максимально допустимой нагрузки.

При выборе профнастила для кровельного покрытия и стеновых ограждений этот показатель имеет решающее значение. Стоит помнить, что существует несколько видов расчетных нагрузок на профлист:

  • Ветровая;
  • Снеговая;
  • Собственный вес (для кровельных покрытий)

Характеристки несущего профнастила

Несущий профнастил – вид профилированного листового материала, отличается высокой прочностью, деформационной стойкостью. Обладает высоким гофром, дополнительными ребрами жесткости. Применяется в кровельных и общестроительных работах для изготовления несъемной опалубки, листовой арматуры и т.д. Несущий лист может обладать цинковым и декоративно-защитным полимерным покрытием.

Расчет несущей способности профнастила

Несущая способность профлиста определяется допустимыми нагрузками, которые материал может выдержать без проявления необратимых последствий: деформация, разрыв и т. д. Ниже в таблице приведены справочные величины для популярных стеновых, универсальных и несущих марок.

Важно! Предел максимально допустимой нагрузки зависит не только от собственных свойств профнастила, но и от схемы укладки и шага опор (пролета).

Наиболее популярные схемы укладки:

  • Однопролетная
  • Двухпролетная
  • Трехпролетная
  • Четырехпролетная

Шаг опор может составлять от 1 до 6 метров при ширине крайней опоры — не менее 40 мм и средних — не менее 80 мм

Предельные равномерно распределенные нагрузки на профнастил 

В таблице приведены справочные значения  в кг/м.кв для стали минимально допустимой толщины. Для расчета нагрузки в случае профилирования стали иных толщин табличное значение умножают на соотношение толщины стали в таблице и толщины стали профлиста для которого осуществляется расчет. 

Марка

Шаг опор, м

1-пролетная, 

2-пролетная

3-пролетная

4-пролетная

С-8

1,0

86

143

118

110

1,2

50

83

68

64

С-10

1,0

86

143

118

110

1,2

50

83

68

64

1,8

56

140

115

109

2,0

41

102

84

79

НС-20

1,5

97

242

136

187

1,8

56

140

115

109

2,0

41

102

84

79

НС-44

3,0

81

248

285

273

Н-57

3,0

210

190

220

226

Н-60

3,0

323

230

269

257

4,0

102

172

184

175

 

Обратитесь к менеджеру ООО «НТК», чтобы узнать стоимость и купить профнастил по цене производителя!

размеры и вес оцинкованных профнастилов, несущая способность, рабочая ширина и другие технические характеристики

Профлист Н60, обладающий высокой несущей способностью, пользуется популярностью в сфере частного домостроения. Размеры и вес, рабочая ширина и другие технические характеристики этого материала позволяют ему обеспечивать возводимым конструкциям высокую жесткость и прочность. О применении оцинкованного профнастила и листов Н60 с полимерным покрытием, правилах их выбора, монтаже стоит рассказать более подробно.

Технические характеристики

Стальной оцинкованный лист Н60 представляет собой популярную разновидность кровельных покрытий. Установленные стандарты подразумевают выпуск нескольких типов такой продукции. По ГОСТу Р 52246-2004 изготавливают оцинкованные материалы, полученные методом холодного проката. Имеющий полимерное покрытие лист относится к другому стандарту. Его нормируют по ГОСТу Р 52146-2003.

Маркировка с литерой Н определяет тип материала — несущий. Такие материалы отличает высокая надежность при относительно небольшой массе и толщине. Высокий профиль в этом случае является весомым преимуществом, отличающим конструкцию от стеновых аналогов. Лист обладает повышенным уровнем жесткости, его можно укладывать горизонтально, крепить вертикально и по диагонали, получая покрытие, выдерживающее значительные нагрузки.

Основное отличие профлиста Н60 от Н57 и других разновидностей заключается в высоте профиля. Здесь она составляет 60 мм, по форме выступающая часть может быть трапециевидной или волнистой.

Стандартные рабочие характеристики материала можно описать следующим образом.

  1. Масса. Вес 1 м2 профлиста зависит от его толщины. При равных габаритах листы 0,7 мм будут весить 8,75 кг/м2, 0,9 мм — 11 кг/м2.
  2. Габариты. Обычно определяется 2 основных параметра — рабочая и полная ширина. У профлиста Н60 эти размеры отличаются. Рабочая ширина составляет 845 мм, полная — 902 мм. Длина зависит от пожеланий заказчика, но не превышает 12 м.
  3. Толщина. Она варьируется в диапазоне от 0,7 до 0,9 мм.
  4. Несущая способность. Профнастил этой марки при толщине 0,7 мм может перекрывать пролеты до 3-4 м. При наличии 2 опор его несущая способность составит 323 кг/м2, при 3 — 230 кг/м2. Для других вариантов толщины металла показатели будут меняться.

Расчет нагрузки на профнастил можно произвести самостоятельно, принимая во внимание предполагаемую силу ветра, массу снега, а также собственный вес листа.

Наклонные кровли легче переносят нагрузки, поэтому их можно делать с меньшим количеством опор и пролетов.

Сферы применения

Основная сфера применения профлиста марки Н60 связана со строительством. Кровельный материал подходит для укладки на крышу со сложной геометрией, без ограничения по площади. Его можно монтировать на кровлю с пролетами до 3-4 метров, не устанавливая вспомогательные опоры. Высокие несущие способности дополняются удобством раскроя. Можно нарезать материал полотнами длиной до 12 м на любые отрезки, кратные 1 м.

К сферам применения профлистов марки Н60 также можно отнести следующее.

  1. Создание опалубки. Материал применяется при обустройстве железобетонных перекрытий. Опалубка делается несъемной, сохраняется после заливки.
  2. Формирование межэтажных перекрытий. Профлист применяют в тех случаях, когда они изготавливаются не из бетонного монолита, а из других материалов.
  3. Изготовление многослойных плоских крыш. Здесь жесткий профиль становится основанием, поверх которого монтируется основной кровельный пирог. На него укладывается утеплитель, затем рулонный материал. Технология используется в гражданском и коммерческом строительстве, на промышленных объектах.
  4. Формирование диафрагм жесткости. Они необходимы в каркасных конструкциях зданий. Профлист Н60 хорошо подходит для этих целей.
  5. Изготовление ограждений. Листы монтируются в горизонтальном и вертикальном положении, могут образовывать временные или постоянные заборы. Эта марка профнастила подходит для монтажа на фундаменте или в подвесном варианте, со сплошным соединением листов, может входить в состав модульных ограждений.
  6. Монтаж наружных стен зданий, сооружений. Устойчивый к ветровым нагрузкам профлист используют при изготовлении ангаров, складских комплексов, хозяйственных помещений, бытовок. Он может включать дополнительную теплоизоляцию или эксплуатироваться без нее.

    Это основные сферы применения листов марки Н60. Изделия хорошо зарекомендовали себя в различных областях строительства, устойчивы к снеговым нагрузкам, другим внешним воздействиям. Могут использоваться и для других хозяйственных нужд.

    Как делают профнастил?

    Изготовление профилированного стального листа осуществляется с использованием специального промышленного оборудования, автоматически выполняющего большую часть задач. Именно здесь из обычного стального полотна получают гофрированное, с определенным типом рельефа. Оцинкованный металл проходит через валы профилекатного станка, затем поступает на гильотину, осуществляющую раскрой под нужный размер.

    Изделия марки Н60 чаще всего реализуется в окрашенном виде. Нанесение внешнего декоративного слоя осуществляется путем распыления полимерной смеси под давлением или через процесс электролиза. Полученное покрытие приобретает механическую и коррозионную стойкость. Окрашивание производится по 1 или 2 сторонам листа.

    Советы по выбору

    Планируя приобретение профнастила Н60, следует обращать внимание не только на выгодную стоимость продукции. Она будет более привлекательной при покупке без посредников, напрямую от производителя. Основными критериями выбора будут следующие моменты.

    1. Соответствие материала требованиям ГОСТа. Выпущенные по техническим условиям изделия могут иметь кардинально иные параметры.
    2. Наличие дополнительного декоративного слоя. Полимерное покрытие не только придает конструкции дополнительную привлекательность, но и имеет повышенную антикоррозионную защиту. Обычный оцинкованный профлист чаще всего используют для создания ограждений, обшивки сараев.
    3. Внешнее состояние. И цинковое покрытие, и полимерное окрашивание не должно иметь следов отслоения, трещин, пятен, других дефектов. Следы коррозии по кромке — повод для отказа от покупки листа.
    4. Толщина. Она определяется исходя из назначения конструкции. Чем выше требования к несущей способности, тем толще должен быть выбираемый профлист.
    5. Расположение лакокрасочного слоя. При наличии покрытия оно может быть односторонним или двусторонним. Первый вариант используется в качестве кровельного материала, второй — для создания ограждений.

    Цветовая гамма окрашенного полимерными составами профлиста довольно разнообразна. Для кровли чаще всего выбирают более яркие оттенки, для забора — нейтральные, легко моющиеся тона.

    Особенности монтажа

    Чаще всего профлист Н60 используется в качестве покрытия кровли. Здесь его характеристики и параметры оказываются наиболее востребованными. Укладывать материал нужно обязательно на специально подготовленное основание. В этом качестве выступает обрешетка, формируемая из пиломатериалов, чаще всего бруса. Она формируется с определенным шагом между лагами, для профлиста Н60 максимальные габариты этого просвета составляют 3 м.

    Затем монтаж продолжается по следующей схеме.

    1. Укладывается гидроизолирующее покрытие. В зависимости от назначения кровельной конструкции, в этом качестве выступает полиэтиленовая пленка или рубероид. Битумные материалы не стоит использовать в сочетании с профлистом, имеющим полимерное покрытие — он негативно влияет на состояние пластифицирующих веществ, разрушает их.
    2. Формируется вентиляционный зазор. Его создают при помощи контробрешетки, монтируемой поверх гидроизоляции.
    3. Укладывается профлист. На скатных крышах рекомендуется применять коньковый уплотнитель. Сами листы крепятся саморезами с шайбами, предназначенными специально для кровельных работ. Укладку лучше начинать по направлению ветра, так будет меньше сложностей с парусностью.
    4. Фиксация доборов и других компонентов кровли. Их устанавливают после того, как основное покрытие будет смонтировано.

    По завершении монтажа кровля из профнастила готова к эксплуатации. При использовании в конструкции заборов и других ограждений материал просто крепят на опорах к поперечным лагам-направляющим.

    Профнастил Н60 в Чебоксарах | СтройМеталлСервис

    Профиль Н-60

    Профилированный лист Н-60 – многофункциональный стройматериал с довольно высокой несущей способностью. Он может благополучно «пережить» даже максимально агрессивные условия службы, что позволяет использовать Н-60 не только в частном домостроении, но и на масштабных промышленных объектах. Его способность выдерживать большие статические и динамические нагрузки обеспечивает высота трапеции – 60 мм, а также наличие добавочных рёбер жёсткости, которые проходят вдоль широких гофр профлиста. Значительная прочность и малый вес материала позволяют перекрывать проёмы длиной до 3-4 метров без дополнительных промежуточных опор. Столь выдающиеся характеристики сделали Н-60 весьма востребованным профилем для таких работ, как: возведение временных и постоянных, монтаж несъёмной опалубки, межэтажных перекрытий и перегородок, строительство каркасных зданий, ограждений, обустройство кровли. В качестве сырья для данного проката используется стальной лист плотностью от 0,5 до 1 мм. Изначально весь металл оцинкован, также может быть использована сталь с полимерным покрытием. Он повысит коррозионную стойкость стали и подарит большой ассортимент оттенков и фактур для вашего проекта.

    Покрытие Цинк

    Цинк ― металл, активно применяемый для обработки металлопроката с целью защиты от ржавчины. Во-первых, он представляет собой физическую преграду для агрессивных веществ, не давая им контактировать со стальной основой. Во-вторых, за счёт устойчивости цинка к атмосферной коррозии, такое покрытие будет предохранять кровлю даже при повреждении барьерного слоя. Наиболее распространённые виды цинкования – холодное и горячее. При первом варианте цинк наносится, как краска, например, краскопультом. Второй тип ― сталь окунают в ёмкость с жидким цинком. Мы используем второй метод, поскольку он позволяет распределить покрытие более равномерно. Необработанных участков нет, поэтому, металл надёжно защищён от воздействия агрессивной среды. Долговременная защита и доступная цена цинкового покрытия ― его неоспоримые преимущества! Если вы желаете придать больше оригинальности и эстетики кровле, обратите внимание на полимерные покрытия Компании Металл Профиль.

    Преимущества

    • Легко транспортировать и монтировать за счёт небольшого удельного веса.
    • Сочетается с любым дизайн-проектом.
    • Высокая ремонтопригодность: небольшие царапины можно обработать ремонтной эмалью, а дефектные сегменты заменить на новые металлические листы.
    • Стойкость к механическим повреждениям, ультрафиолету и сложным климатическим условиям.
    • Невысокая цена и простота обслуживания.
    • Огнестойкость и экологичность.
    • Широкий спектр видов профиля с разной несущей способностью.
    • Продолжительный срок эксплуатации — до 50 лет*.
       

    Н-60

    Профнастил Н-60 относится к группе профилированных листов с наибольшей несущей способностью. Профлист Н-60-845 изготавливается из оцинкованной холоднокатаной стали по ГОСТ Р 52246-2004 или оцинкованной стали с полимерным покрытием по ГОСТ Р 52146-2003. Изготовление и технические характеристики для применения данного листового профиля соответствуют требованиям ГОСТ 24045-94 и ТУ 5285-001-51054397-2015.

    Отличается профлист Н-60 от других марок профнастила высотой трапецией профиля. Именно высота волны или гофры определяет главную характеристику этих материалов — их несущую способность.

    Профнастил Н-60-845 может выдерживать очень высокие статические и динамические нагрузки. Это позволяет применять его не только для монтажа быстровозводимых зданий и строительства индивидуальных жилых домов, но и для возведения крупных промышленных объектов. При этом вес профлиста Н-60-845-0.8 составляет всего около 10 кг на 1 м2.

    Купить профнастил Н-60 от производителя в Москве или Ясногорске. 

    Завод по производству профилированного листа ГК «КСС» выпускает профнастил Н-60 различных видов: с полимерным покрытием и без него. Профнастил Н-60 у нас можно приобрести по рыночной цене, поскольку покупать у производителя надежней и дешевле. 

    Каталог продукции, которую выпускает ГК «КСС», можно найти на нашем сайте в разделе «Справочник». Цена на профнастил Н-60 зависит от марки стали и толщины, покрытия его типа и класса, а так же многих других показателей. Специалисты нашей компании расскажут Вам обо всех возможных нюансах и ответят на все интересующие Вас вопросы.

    Узнать стоимость  профнастила Н-60 от производителя можно узнать, связавшись с нашим Центральным офисом продаж по бесплатному номеру 8 (800) 777-75-27.

    Продажа профнастила Н-60 осуществляется со складов ГК «КСС» в Москве и в Ясногорске, чтобы получить дополнительную информацию о продукции, обратитесь к представителю компании через форму обратной связи на сайте или по телефону.

    Наши специалисты не оставят Вас без внимания и помогут Вам сделать расчет материала, выбрать комплектующие и аксессуары, ответят на все вопросы по стоимости, ассортименту, оплате и доставке нашей продукции.

     

    Профнастил н60: технические характеристики и возможности

    Строительство нового промышленного объекта или частного дома ставит первоочередной задачей выбор прочных, качественных материалов, служащих долго и не требующих дополнительных затрат на обслуживание. В последнее время все большее применение находят профильные листы из высоколегированной стали с полимерным или оцинкованным покрытием. Долговечность определяется полувековым периодом, обслуживание требует наличия воды, в отдельных случаях — моющих средств.

    Характеристика профлиста Н-60

    Профилированные поверхности выдерживают сильные нагрузки статического и динамического свойства.

    Внимание!!! Наши читатели считают, что утренняя рыбалка — миф! Раскрыт секрет улова, необходимо всего лишь растворить 1 пакетик в 0,5 литрах воды читать далее…

    Физические характеристики

    Одним из наиболее износостойких и долговечных признан профнастил н60. Маркировка указывает на принадлежность к универсальному типу покрытий, позволяющих использовать профилированные пластины для кровли и облицовки зданий. Согласно стандартам, профлист указанного типа отличается особой прочностью, разрешающей установку несущих конструкций здания.Высота профиля составляет 60 миллиметров, подчеркивая значительные несущие качества. Наличие продольных ребер жесткости позволяют использование профнастила в качестве основного элемента безопалубочных перекрытий. Небольшой вес профнастила н60 позволяет в короткие сроки перекрыть внушительные площади без возведения частых громоздких опор.

    Пластичность профильной пластины позволяет нарезку длиной от одного до двенадцати метров, вариации дают возможность облицовки и перекрытия небольших плоскостей без дополнительной резки материала, сокращая процент отходов.

    Модифицированный профнастил н60 845 отличается усилением ребра жесткости. Изготавливается способом холодного проката из высоколегированной стали. При ширине 845 миллиметров, вес пластины колеблется от 0,8 до 0.9 мм, вес составляет всего десять килограмм на погонный метр, что значительно упрощает высотный монтаж. Возможность выдерживать большие нагрузки позволяет возведение зданий из профнастила в короткие сроки без применения специальных укреплений фасада.

    Функциональные возможности

    Опалубка из профнастила

    Физические характеристики, отличающие профнастил н60, позволяют применять его не только для облицовки и настила крыш. Повышенная несущая способность металлопрофиля применяется во время возведения железобетонных конструкций для создания несъемной опалубки. Профнастилом указанного типа перекрывают плоские промышленные и частные постройки. Последующая установка утеплителя и рулонного кровельного покрытия на поверхность не требуют дополнительного усиления конструкции.

    Укрепить междуэтажную зону вполне достаточно профнастилом повышенной прочности, не применяя монолитного бетонирования. Каркасные здания в последнее время возводят именно из оцинкованного профилированного металла. Возможности ребер жесткости разрешает использовать материал в качестве основной составляющей.

    Оцинковка позволяет использовать металлический профиль для отделки внутренних поверхностей и наружных работ. Дополнительное полимерное покрытие продлевает срок службы и позволяет выполнять авторские проекты благодаря разнообразию цвета и вариаций на тему натуральных материалов: дерева, камня.

    Правильный выбор

    Закупку облицовочного материала производят в больших строительных супермаркетах, предоставляющих огромный выбор. Цена формируется с учетом транспортных расходов. Следовательно, покупка профнастила н60 местного изготовления дешевле, нежели привезенного издалека.

    Чертеж профнастила

    Покупая плиты металлопрофиля, необходимо учесть некоторые особенности. Большую партию лучше всего приобрести непосредственно на заводе-изготовителе, избавившись от необходимости платить посредникам. То же касается и транспортировки. Самовывоз обойдется дешевле. Доставить профлист можно из любого города, где его производят, оптимальный способ — ближайшая точка изготовления. Приобретение необходимо внимательно обследовать на предмет повреждений и царапин.

    Поврежденное покрытие приведет к быстрому возникновению ржавчины на поверхности, что чревато не только заменой одного листа, но и перестройкой всей поверхности

    Монтаж и уход

    Монтируется профлист н60 аналогично профильным пластинам разных марок. Крепежный материал должен иметь винтообразный наконечник, позволяющий прикрепить лист без лишних усилий с помощью специального шуруповерта. Наличие пропиленовой прокладки обезопасит плиту металлопрофиля от повреждения поверхности. Крепить металлический профилированный лист лучше всего в изгиб волны, чтобы избежать повреждений при сильном ветре.

    Уход за поверхностями из профильной стали простой. Очищается поверхность с помощью обычной воды или с использованием моющих средств. Касаемо крыши, ежегодно необходимо чистить дождевые отливы, оберегая здание от проникновения дождевых масс под кромку. Образовавшиеся царапины на покрытии из полиэстера защищает слой оцинковки, но для лучшей сохранности профнастила необходимо прокрасить спреем подходящего цвета места повреждения.

    % PDF-1.5 % 1 0 объект > >> эндобдж 4 0 obj / CreationDate (D: 20170703184837 + 06’00 ‘) / ModDate (D: 20170703184837 + 06’00 ‘) /Режиссер / rgid (PB: 318110370_AS: 512020060360705 @ 14903544) >> эндобдж 2 0 obj > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 5 0 obj > / XObject> / Шрифт> >> / MediaBox [0 0 594.95996 840.95996] / Аннотации [54 0 R 55 0 R 56 0 R 57 0 R 58 0 R 59 0 R 60 0 R 61 0 R 62 0 R 63 0 R] / Содержание 64 0 руб. / StructParents 0 / Родитель 2 0 R >> эндобдж 6 0 obj > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [74 0 R 75 0 R 76 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 77 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 0 >> эндобдж 7 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 84 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 1 >> эндобдж 8 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 92 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 2 >> эндобдж 9 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [109 0 R 110 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 111 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 3 >> эндобдж 10 0 obj > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [112 0 R 113 0 R 114 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 115 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 60 >> эндобдж 11 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 116 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 64 >> эндобдж 12 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [118 0 R 119 0 R 120 0 R 121 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 122 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 65 >> эндобдж 13 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 125 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 70 >> эндобдж 14 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 127 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 71 >> эндобдж 15 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 129 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 72 >> эндобдж 16 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [131 0 R 132 0 R 133 0 R 134 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 135 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 73 >> эндобдж 17 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [138 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 139 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 78 >> эндобдж 18 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 140 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 80 >> эндобдж 19 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 141 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 81 >> эндобдж 20 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 142 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 82 >> эндобдж 21 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [144 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 145 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 83 >> эндобдж 22 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [147 0 R 148 0 R 149 0 R 150 0 R 151 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 152 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 85 >> эндобдж 23 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 154 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 4 >> эндобдж 24 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 155 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 7 >> эндобдж 25 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 156 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 8 >> эндобдж 26 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 158 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 9 >> эндобдж 27 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [160 0 R 161 0 R 162 0 R 163 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 164 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 10 >> эндобдж 28 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [176 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 177 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 5 >> эндобдж 29 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [179 0 R 180 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 181 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 16 >> эндобдж 30 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [183 0 R 184 0 R 185 0 R 186 0 187 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 188 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 19 >> эндобдж 31 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 189 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 25 >> эндобдж 32 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 192 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 26 >> эндобдж 33 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 194 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 27 >> эндобдж 34 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [196 0 197 0 ₽ 198 0 ₽ 199 0 200 0 ₽] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 201 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 28 >> эндобдж 35 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [202 0 R 203 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 204 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 34 >> эндобдж 36 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [206 0 R 207 0 R 208 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 209 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 37 >> эндобдж 37 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 211 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 41 >> эндобдж 38 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 212 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 42 >> эндобдж 39 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [213 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 214 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 43 >> эндобдж 40 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [215 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 216 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 45 >> эндобдж 41 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [218 0 R 219 0 R 220 0 R 221 0 R 222 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание 223 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 47 >> эндобдж 42 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [227 0 R 228 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841,68] / Содержание 229 0 руб. / Группа> / Вкладки / S / StructParents 6 >> эндобдж 43 0 объект > / ExtGState> / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC / ImageI] >> / Аннотации [231 0 R 232 0 R 233 0 R] / MediaBox [0 0 595.44 841.68] / Содержание [234 0 R 235 0 R] / Группа> / Вкладки / S / StructParents 55 >> эндобдж 44 0 объект > эндобдж 45 0 объект > эндобдж 46 0 объект > эндобдж 47 0 объект > эндобдж 48 0 объект > эндобдж 49 0 объект > транслировать xyp} h if & i22S4dIҤMIv1M6N2iCMdhJƷ | `cc | bԧ $> uCƦHZmp: ˫ ߻ Z ~ Ϯ} ww? ~ _R ​​

    Bentley — Документация по продукту

    MicroStation

    Справка MicroStation

    Ознакомительные сведения о MicroStation

    Справка MicroStation PowerDraft

    Ознакомительные сведения о MicroStation PowerDraft

    Краткое руководство по началу работы с MicroStation

    Справка по синхронизатору iTwin

    ProjectWise

    Служба поддержки Bentley Automation

    Ознакомительные сведения об услуге Bentley Automation

    Сервер композиции Bentley i-model для PDF

    Подключаемый модуль службы разметки

    PDF для ProjectWise Explorer

    Справка администратора ProjectWise

    Справка службы загрузки данных ProjectWise Analytics

    Коннектор ProjectWise для ArcGIS — Справка по расширению администратора

    Коннектор ProjectWise для ArcGIS — Справка по расширению Explorer

    Коннектор ProjectWise для ArcGIS Справка

    Коннектор ProjectWise для Oracle — Справка по расширению администратора

    Коннектор ProjectWise для Oracle — Справка по расширению Explorer

    Коннектор ProjectWise для справки Oracle

    Коннектор управления результатами ProjectWise для ProjectWise

    Справка портала управления результатами ProjectWise

    Ознакомительные сведения по управлению поставками ProjectWise

    Справка ProjectWise Explorer

    Справка по управлению полевыми данными ProjectWise

    Справка администратора ProjectWise Geospatial Management

    Справка ProjectWise Geospatial Management Explorer

    Сведения о геопространственном управлении ProjectWise

    Модуль интеграции ProjectWise для Revit Readme

    Руководство по настройке управляемой конфигурации ProjectWise

    Справка по ProjectWise Project Insights

    ProjectWise Plug-in для Bentley Web Services Gateway Readme

    ProjectWise ReadMe

    Матрица поддержки версий ProjectWise

    Веб-справка ProjectWise

    Справка по ProjectWise Web View

    Справка портала цепочки поставок

    Управление эффективностью активов

    Справка по AssetWise 4D Analytics

    Справка по услугам AssetWise ALIM Linear Referencing Services

    AssetWise ALIM Web Help

    Руководство по внедрению AssetWise ALIM в Интернете

    AssetWise ALIM Web Краткое руководство, сравнительное руководство

    Справка по AssetWise CONNECT Edition

    AssetWise CONNECT Edition Руководство по внедрению

    Справка по AssetWise Director

    Руководство по внедрению AssetWise

    Справка консоли управления системой AssetWise

    Руководство администратора мобильной связи TMA

    Справка TMA Mobile

    Анализ мостов

    Справка по OpenBridge Designer

    Справка по OpenBridge Modeler

    Строительное проектирование

    Справка проектировщика зданий AECOsim

    Ознакомительные сведения AECOsim Building Designer

    AECOsim Building Designer SDK Readme

    Генеративные компоненты для справки проектировщика зданий

    Ознакомительные сведения о компонентах генерации

    Справка по OpenBuildings Designer

    Ознакомительные сведения о конструкторе OpenBuildings

    Руководство по настройке OpenBuildings Designer

    OpenBuildings Designer SDK Readme

    Справка по генеративным компонентам OpenBuildings

    Ознакомительные сведения по генеративным компонентам OpenBuildings

    Справка OpenBuildings Speedikon

    Ознакомительные сведения OpenBuildings Speedikon

    OpenBuildings StationDesigner Help

    OpenBuildings StationDesigner Readme

    Гражданское проектирование

    Помощь в канализации и коммунальных услугах

    Справка OpenRail ConceptStation

    Ознакомительные сведения по OpenRail ConceptStation

    Справка по OpenRail Designer

    Ознакомительные сведения по OpenRail Designer

    Справка конструктора надземных линий OpenRail

    Справка OpenRoads ConceptStation

    Ознакомительные сведения по OpenRoads ConceptStation

    Справка по OpenRoads Designer

    Ознакомительные сведения по OpenRoads Designer

    Справка по OpenSite Designer

    Файл ReadMe для OpenSite Designer

    Строительство

    ConstructSim Справка для руководителей

    ConstructSim Исполнительное ReadMe

    ConstructSim Справка издателя i-model

    Справка по планировщику ConstructSim

    ConstructSim Planner ReadMe

    Справка стандартного шаблона ConstructSim

    ConstructSim Work Package Server Client Руководство по установке

    Справка по серверу рабочих пакетов ConstructSim

    ConstructSim Work Package Server Руководство по установке

    Справка управления SYNCHRO

    SYNCHRO Pro Readme

    Энергия

    Справка по Bentley Coax

    Справка по Bentley Communications PowerView

    Ознакомительные сведения о Bentley Communications PowerView

    Справка по Bentley Copper

    Справка по Bentley Fiber

    Bentley Inside Plant Help

    Справка конструктора Bentley OpenUtilities

    Ознакомительные сведения о Bentley OpenUtilities Designer

    Справка по подстанции Bentley

    Ознакомительные сведения о подстанции Bentley

    Справка по OpenComms Designer

    Ознакомительные сведения о конструкторе OpenComms

    Справка OpenComms PowerView

    Ознакомительные сведения OpenComms PowerView

    Справка инженера OpenComms Workprint

    OpenComms Workprint Engineer Readme

    Справка подстанции OpenUtilities

    Ознакомительные сведения о подстанции OpenUtilities

    PlantSight AVEVA Diagrams Bridge Help

    PlantSight AVEVA PID Bridge Help

    Справка по экстрактору мостов PlantSight E3D

    Справка по PlantSight Enterprise

    Справка по PlantSight Essentials

    PlantSight Открыть 3D-модель Справка по мосту

    Справка по PlantSight Smart 3D Bridge Extractor

    Справка по PlantSight SPPID Bridge

    Promis.e Справка

    Promis.e Readme

    Руководство по установке Promis.e — управляемая конфигурация ProjectWise

    Руководство пользователя sisNET

    Руководство по настройке подстанции

    — управляемая конфигурация ProjectWise

    Инженерное сотрудничество

    Справка рабочего стола Bentley Navigator

    Геотехнический анализ

    PLAXIS LE Readme

    Ознакомительные сведения о PLAXIS 2D

    Ознакомительные сведения о программе просмотра вывода PLAXIS 2D

    Ознакомительные сведения о PLAXIS 3D

    Ознакомительные сведения о программе просмотра 3D-вывода PLAXIS

    PLAXIS Monopile Designer Readme

    Управление геотехнической информацией

    Справка администратора gINT

    Справка gINT Civil Tools Pro

    Справка gINT Civil Tools Pro Plus

    Справка коллекционера gINT

    Справка по OpenGround Cloud

    Гидравлика и гидрология

    Справка Bentley CivilStorm

    Справка Bentley HAMMER

    Справка Bentley SewerCAD

    Справка Bentley SewerGEMS

    Справка Bentley StormCAD

    Справка Bentley WaterCAD

    Справка Bentley WaterGEMS

    Проектирование шахты

    Справка по транспортировке материалов MineCycle

    Ознакомительные сведения по транспортировке материалов MineCycle

    Моделирование мобильности

    LEGION 3D Руководство пользователя

    Справка по подготовке САПР LEGION

    Справка по построителю моделей LEGION

    Справка по API симулятора LEGION

    Ознакомительные сведения об API симулятора LEGION

    Справка по симулятору LEGION

    Моделирование

    Bentley Посмотреть справку

    Ознакомительные сведения о Bentley View

    Анализ морских конструкций

    SACS Close the Collaboration Gap (электронная книга)

    Ознакомительные сведения о SACS

    Анализ напряжений в трубах и сосудов

    AutoPIPE Accelerated Pipe Design (электронная книга)

    Советы новым пользователям AutoPIPE

    Краткое руководство по AutoPIPE

    AutoPIPE & STAAD.Pro

    Завод Проектирование

    Ознакомительные сведения об экспортере завода Bentley

    Bentley Raceway and Cable Management Help

    Bentley Raceway and Cable Management Readme

    Bentley Raceway and Cable Management — Руководство по настройке управляемой конфигурации ProjectWise

    Справка по OpenPlant Isometrics Manager

    Ознакомительные сведения о диспетчере изометрических данных OpenPlant

    Справка OpenPlant Modeler

    Ознакомительные сведения для OpenPlant Modeler

    Справка по OpenPlant Orthographics Manager

    Ознакомительные сведения для менеджера орфографии OpenPlant

    Справка OpenPlant PID

    Ознакомительные сведения о PID OpenPlant

    Справка администратора проекта OpenPlant

    Ознакомительные сведения для администратора проекта OpenPlant

    Техническая поддержка OpenPlant Support

    Ознакомительные сведения о технической поддержке OpenPlant

    Справка PlantWise

    Ознакомительные сведения о PlantWise

    Реальность и пространственное моделирование

    Справка по карте Bentley

    Справка по мобильной публикации Bentley Map

    Ознакомительные сведения о карте Bentley

    Справка консоли облачной обработки ContextCapture

    Справка редактора ContextCapture

    Файл ознакомительных сведений для редактора ContextCapture

    Мобильная справка ContextCapture

    Руководство пользователя ContextCapture

    Справка Декарта

    Ознакомительные сведения о Декарте

    Справка карты OpenCities

    Ознакомительные сведения о карте OpenCities

    OpenCities Map Ultimate для Финляндии Справка

    Карта OpenCities Map Ultimate для Финляндии Readme

    Структурный анализ

    Справка OpenTower iQ

    Справка по концепции RAM

    Справка по структурной системе RAM

    STAAD Close the Collaboration Gap (электронная книга)

    STAAD.Pro Help

    Ознакомительные сведения о STAAD.Pro

    STAAD.Pro Physical Modeler

    Расширенная справка по STAAD Foundation

    Дополнительные сведения о STAAD Foundation

    Детализация конструкций

    Справка ProStructures

    Ознакомительные сведения о ProStructures

    ProStructures CONNECT Edition Руководство по внедрению конфигурации

    ProStructures CONNECT Edition Руководство по установке — Управляемая конфигурация ProjectWise

    IR30.D24L-N60.UA1E.7BO | Индуктивные датчики расстояния

    CAM12.A4-11232793

    Номер артикула: 11232793

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 200 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11232794

    Номер артикула: 11232794

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 500 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11232795

    Номер артикула: 11232795

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 1000 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11232797

    Номер артикула: 11232797

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 200 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11232798

    Номер артикула: 11232798

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 500 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11232799

    Номер артикула: 11232799

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; ПВХ, 1000 см, свободный конец кабеля
    • Подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    CAM12.A4-11230400

    Номер артикула: 11230400

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 100 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, огню, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230334

    Номер артикула: 11230334

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 200 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230929

    Номер артикула: 11230929

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 300 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230335

    Номер артикула: 11230335

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230336

    Номер товара: 11230336

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1000 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230930

    Номер артикула: 11230930

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230931

    Номер артикула: 11230931

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 2000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230403

    Номер артикула: 11230403

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 100 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230342

    Номер артикула: 11230342

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 200 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230934

    Номер артикула: 11230934

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 300 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230343

    Номер артикула: 11230343

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230344

    Номер артикула: 11230344

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1000 см, свободный конец кабеля
    • с возможностью перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230935

    Номер артикула: 11230935

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230936

    Номер артикула: 11230936

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 2000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232883

    Номер артикула: 11232883

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 100 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового соединения
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230347

    Номер артикула: 11230347

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 200 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232884

    Номер артикула: 11232884

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 300 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового соединения
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, огню, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230349

    Номер артикула: 11230349

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230350

    Номер артикула: 11230350

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232885

    Номер артикула: 11232885

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232886

    Номер артикула: 11232886

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 2000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230409

    Номер артикула: 11230409

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 100 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового соединения
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230354

    Номер артикула: 11230354

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 200 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230939

    Номер артикула: 11230939

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 300 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового соединения
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, огню, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230355

    Номер артикула: 11230355

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230356

    Номер товара: 11230356

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230940

    Номер артикула: 11230940

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 1500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232888

    Номер артикула: 11232888

    • M12, розетка, кодировка A, 4 полюса; Полиуретан, 2000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • С возможностью тягового усилия
    • Головка A: IP65, IP66K, IP67
    • Кабель: хорошая устойчивость к химическим веществам, пламени, маслам
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232900

    Номер артикула: 11232900

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 100 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230379

    Номер артикула: 11230379

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 200 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232901

    Номер артикула: 11232901

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 300 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230380

    Номер артикула: 11230380

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230381

    Номер артикула: 11230381

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232902

    Номер артикула: 11232902

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232903

    Номер артикула: 11232903

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 2000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232904

    Номер артикула: 11232904

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 100 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230382

    Номер артикула: 11230382

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 200 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232905

    Номер артикула: 11232905

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 300 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230383

    Номер артикула: 11230383

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230384

    Номер артикула: 11230384

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232906

    Номер артикула: 11232906

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1500 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232907

    Номер артикула: 11232907

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 2000 см, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232923

    Номер артикула: 11232923

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 100 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230968

    Номер артикула: 11230968

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 200 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232924

    Номер артикула: 11232924

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 300 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230463

    Номер артикула: 11230463

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 500 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230969

    Номер артикула: 11230969

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1000 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232925

    Номер артикула: 11232925

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232926

    Номер артикула: 11232926

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 2000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232928

    Номер артикула: 11232928

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 100 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230970

    Номер артикула: 11230970

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 200 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232929

    Номер артикула: 11232929

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 300 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230464

    Номер артикула: 11230464

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 500 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11230971

    Номер артикула: 11230971

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1000 см, экранированный, со свободным концом кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232930

    Номер артикула: 11232930

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 1500 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания цепи; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов
    CAM12.A4-11232931

    Номер артикула: 11232931

    • M12, розетка, кодировка A; 4-полюсный; TPE-S, 2000 см, экранированный, свободный конец кабеля
    • Возможность перетаскивания; подходит для робототехники ± 180 ° / м; подходит для продуктов питания и напитков
    • Головка A: IP65, IP68, IP69K
    • Проверено ECOLAB
    • Без галогенов

    Программное обеспечение для испытания несущей способности, нагрузки на пластину и измерителя давления — Программное обеспечение Novo Tech

    Последняя версия: 3.0.2020.520
    ————————————————–
    20 мая 2020 г.
    В этой версии в программу включено уравнение корреляций SPT. Улучшения, внесенные в страницу предварительного просмотра печати.
    ————————————————–
    3 мая 2020 г.
    Усовершенствования для импорта из файлов gINT (SmartSync), позволяющие импортировать из более сложных файлов gINT.
    ————————————————–
    8 декабря 2019 г.
    Пять новых корреляций скорости поперечной волны (Vs) были добавлены из PEER 2012/08.
    Эти корреляции разработаны Уэром и ДеДжонгом.
    ————————————————–
    6 марта 2019 г.
    Добавлена ​​новая гибкая система лицензирования. Незначительное удаление ошибок и улучшение производительности.
    ————————————————–
    12 марта 2017 г.
    Устранение мелких ошибок
    —————————————————–
    2 февраля 2014 г.
    Добавлено 10 новых корреляций SPT для Gmax
    ———————————————–
    14 февраля 2013 г.
    Добавлено 10 новых корреляций SPT (в основном для Es и PMT)
    ————— ———————————–
    29 января 2013 г.
    Ошибка удалена из легенды профиля почвы на странице корреляции
    —————————————————
    декабрь 24, 2012
    Добавлены три новых корреляции для Su и одна новая корреляция для скорости поперечной волны.
    ————————————————–
    20 сентября 2012 г.
    Напоминание о подписке добавлено в программу.
    ————————————————–
    2 августа 2012 г.
    — добавлено еще 5 корреляций для скорости поперечной волны (от Нареш Беллана)
    — исправлена ​​ошибка с коррекцией уровня воды на SPT счетчик ударов
    ————————————————––
    5 июля 2012 г.
    Китайский (упрощенный) и турецкий языки добавлены в пользовательский интерфейс и файл справки
    ———————— ————————–
    19 февраля 2012 г.
    Настройки корреляции глубины теперь сохранены в файле проекта
    —————————————————–
    31 января 2012 г.
    Глубина поправочный коэффициент (Cn) теперь вычисляется и наносится на график, когда пользователь вводит счетчик ударов SPT.
    ————————————————–
    24 ноября 2011 г.
    Страница «Начало работы» добавлена ​​в файл справки
    ——— ————–
    31 августа 2011 г. Кривая
    N1 (60) теперь построена с N60 и N
    —————————————————–
    12 августа 2011 г.
    еще 4 корреляции добавлен для сдвига скорость волны (Vs)
    ————————————————–
    8 июля 2011 г.
    Исправлена ​​ошибка, связанная с вычислением эффективного напряжения в британских единицах.
    ————————————————–
    31 мая 2011 г.
    Теперь каждый слой имеет собственное OCR и D50. Это приведет к более точным результатам при работе с теми корреляциями, которые используют OCR и D50.
    ————————————————–
    8 апреля 2011 г.
    Обновлен файл справки.
    —————————————————–
    14 октября 2010 г.
    Отчеты NovoSPT можно экспортировать напрямую в файлы PDF:
    — нет необходимости устанавливать программу записи PDF на компьютер пользователя
    — легче PDF файлы с этой новой функцией
    — быстрый рендеринг PDF с гораздо более высоким качеством диаграмм и изображений
    ————————————————–
    10 июля 2010 г.
    8 корреляций для CBR на основе SPT, добавлен в NovoSPT
    ————————————————–
    2 июля 2010 г.
    Версия 2.1 выпущен. В этой версии пользователь может фильтровать корреляции на основе типа почвы каждого слоя. Например, если на высоте 2,3 м тип почвы — ил и должны отображаться все корреляции для Vs, пользователь может выбрать отображение только корреляций Vs, действительных для илистых почв (прочтите статью Алиреза Афхами).
    ————————————————–
    25 июня 2010 г.
    В NovoSPT добавлены 2 новых корреляции от US Army Corp (для модуля упругости Es).
    ————————————————–
    4 июня 2010 г.
    Метод поправочного коэффициента перекрывающих пород (Cn), который применяется к N60 для получения N1 (60) для корреляций, теперь может быть выбран пользователь (среди 9 методов)
    ————————————————–
    3 мая 2010 г.
    В NovoSPT
    добавлено 5 новых корреляций для контроля проникновения конуса от N60 —————— ——————————–
    24 апреля 2010 г.
    В NovoSPT
    добавлен новый модуль для динамического проникновения конуса (DCP) ————————————————–
    12 апреля, 2010
    новая функция скинов добавлена ​​ко всем программным приложениям Novo Tech, что делает наше программное обеспечение более интуитивно понятным…
    ————————————————–
    5 апреля 2010 г.
    — Описание во входных данных Добавлен столбец для каждого слоя
    — В таблицу SPT добавлены два столбца для поправочного коэффициента глубины (Cn) и других поправок (Cr.Cs.Cb.Ce) фактор
    — Добавлена ​​новая диаграмма для изменения вышеупомянутых поправочных коэффициентов с глубиной (см. Скриншоты)
    —————————————————–
    12 марта 2010 г.
    две новые корреляции для Su и угла расширения
    ————————————————–
    10 марта 2010 г.
    Еще 8 корреляций для теста манометра!
    ————————————————–
    9 февраля 2010 г.
    Устранена ошибка при импорте из инструмента gINT.
    ————————————————–
    20 января 2010 г.
    Еще 11 корреляций для Vs!
    ————————————————–
    19 января 2010 г.
    Добавлены десять новых корреляций для Go, Vs и Su.
    ————————————————–
    11 января 2010 г.
    Обновлено руководство пользователя (справка).
    —————————————————–
    8 января 2010 г.
    Добавлены еще одна корреляция Gmax и еще две корреляции Vs (Alfaro Castillo, 2007).
    ————————————————–
    4 января 2010 г.
    Инструмент автоматического обновления добавлен в программные продукты Novo Tech.
    ————————————————–
    28 декабря 2009 г.
    Добавлены дополнительные ссылки.
    ————————————————–
    25 декабря 2009 г.
    Незначительные улучшения в пользовательском интерфейсе.
    ————————————————–
    14 декабря 2009 г.
    Версия 1.9 только что выпущена с инструментом анализа несущей способности.
    ————————————————–
    13 декабря 2009 г.
    Добавлены следующие функции (обе можно найти в меню «Файл»):
    — Сохранить как…
    — Открыть последние файлы
    ————————————————–
    27 ноября 2009 г.
    Расчет поправки на длину стержня Cr теперь выполняется автоматически.
    ————————————————–
    22 ноября 2009 г.
    Обновлен файл справки NovoSPT; пожалуйста, скачайте здесь.
    —————————————————–
    13 ноября 2009 г.
    Еще 4 корреляции для Su, Es и G0 добавлены
    ——————————————— —–
    10 ноября 2009 г.
    В НовоСПТ добавлено 5 новых соотношений SPT к Gmax и несущей способности сваи.
    ————————————————–
    9 ноября 2009 г.
    Импорт из LogPlot Rockware добавлен в наши продукты (щелкните здесь, чтобы получить дополнительную информацию)
    —————————— ———————–
    7 ноября 2009 г.
    В NovoSPT добавлена ​​новая корреляция количества ударов SPT с углом трения, основанная на Duncan 2004.
    ————————————————–
    5 ноября 2009 г.
    Импорт из Winlog GAEA добавлен в наши продукты (щелкните здесь, чтобы получить дополнительную информацию)
    —————————— ———————–
    21 октября 2009 г.
    В NovoSPT добавлен импорт из файлов Microsoft Excel. Также включено преобразование системы единиц данных.
    ——— ——–
    11 октября 2009 г.
    В NovoSPT добавлен импорт из файлов Microsoft Excel.Также включено преобразование системы единиц данных.
    ————————————————–
    4 октября 2009 г.
    Для «gINT Import Tool» подготовлена ​​полная документация, и файл справки прилагается к последней версии NovoSPT. Пожалуйста, прочтите онлайн-документацию здесь.
    ————————————————–
    2 октября 2009 г.
    Улучшена функция импорта из gINT. Включен автоматический импорт слоев почвы и преобразование системы единиц измерения.
    ————————————————–
    26 сентября 2009 г.
    В NovoSPT добавлен новый метод корреляции между Vs и N1 (60) от Anbazhagan & Sitharam.
    ————————————————–
    25 сентября 2009 г.
    NovoSPT теперь поддерживает как британские, так и метрические системы единиц (обновление до версии 1.8)
    ——————————— ——————–
    10 сентября 2009 г.
    В NovoSPT добавлены новые инструменты: Wildcat Dynamic Penetrometer Analysis (оборудование от Triggs Technologies, США)
    ————————————————— —
    9 сентября 2009 г.
    В NovoSPT добавлено 3 новых корреляции с доктором (Кубриновски и Исихара).
    ————————————————–
    3 сентября 2009 г.
    В NovoSPT добавлены две новые корреляции с Gmax.
    ————————————————–
    27 августа 2009 г.
    В NovoSPT добавлена ​​новая функция, позволяющая пользователю выбирать методы корреляции для каждого параметра. Следовательно, разбросанный график коррелированного значения теперь основан на выборе пользователя. Например, эта функция помогает активировать корреляции, применимые к определенному типу почвы.
    ————————————————–
    25 августа 2009 г.
    Исправлена ​​ошибка при импорте данных SPT из базы данных gINT в свободном формате. Также для каждого соотношения в таблицах результатов указан справочник / статья и N60 / N1 (60).
    ————————————————–
    20 августа 2009 г.
    В NovoSPT добавлена ​​21 новая корреляция для скорости поперечной волны от 16 ученых-геологов.
    ————————————————–
    17 августа 2009 г.
    Функции сохранения и загрузки добавлены в NovoSPT. Теперь вы можете сохранять свои расчеты в файлы * .spt и перезагружать их позже, когда они вам понадобятся. Также к корреляциям добавлены следующие методы: Wolff 1989 и Kulhawy and Mayne 1990 для угла трения, AND Hara et al. 1974 г. для недренированных глин на сдвиг.
    ————————————————–
    15 августа 2009 г.
    В NovoSPT добавлена ​​функция предпочтений. Основная цель этой страницы — установить допустимый диапазон коррелированных геотехнических параметров, поскольку на основе некоторых формул полученные значения иногда выходят за пределы значимого диапазона (например, F> 45º).
    ————————————————–
    11 августа 2009 г.
    В NovoSPT теперь доступна кросс-корреляция. Используя эту функцию, вы можете построить и сравнить различные методы корреляции для параметра почвы на глубине испытательной скважины.
    ————————————————–
    8 августа 2009 г.
    В NovoSPT добавлены еще две корреляции между SPT и пропускной способностью сваи.
    ————————————————–
    6 августа 2009 г.
    Корреляция SPT с динамическим сопротивлением конуса пенетрометра Wildcat (qd) и корреляция с опорой на конце сваи (метод Риза и О’Нила) добавлены в НовоСПТ.
    —————————————————–
    4 августа 2009 г.
    В NovoSPT добавлена ​​новая функция для импорта из файлов gINT, совместимых с форматом AGS, а также с СВОБОДНЫМ ФОРМАТОМ (пользователь может выбрать таблицы сопоставления и поля из базы данных).
    ————————————————–
    27 июля 2009 г.
    Теперь доступен импорт из файлов базы данных gINT. Вы можете загрузить существующие проекты gINT из NovoSPT и выбрать скважину из автоматически заполняемого списка, чтобы импортировать ее данные SPT / DCPT для дальнейшей корреляции.
    ————————————————–
    25 июля 2009 г.
    Отчеты NovoSPT теперь более информативны; Коррелированные значения для каждого параметра отображаются на графике и вставляются под соответствующей таблицей в отчете. См. Образец отчета здесь.
    ————————————————–
    22 июля 2009 г.
    Корреляция SPT с приблизительными весами единиц для песков и глин, добавленных в программное обеспечение.
    ————————————————–
    21 июля 2009 г.
    Корреляция модуля прессиометра (EPMT) с подсчетом ударов SPT, добавленная в программное обеспечение. Также добавлены пять новых корреляций для угла трения почвы (включая Pech, Hanson и Thornburn).
    ————————————————–
    15 июля 2009 г.
    Корреляция Беккера Хаммера с подсчетом ударов SPT добавлена ​​в программное обеспечение. Нажмите сюда, для получения дополнительной информации.
    ————————————————–
    8 июля 2009 г.
    Руководство пользователя (Help) подготовлено для программы. Загрузите файл справки здесь или просмотрите онлайн-документацию здесь.
    ————————————————–
    6 июля 2009 г.
    Первый официальный выпуск.

    Сокристаллические структуры антитела N60-i3 и антитела JR4 в комплексе с gp120 определяют больше эпитопов кластера А, участвующих в эффективной антителозависимой эффекторной функции против ВИЧ-1

    РЕЗЮМЕ

    Накапливающиеся данные указывают на роль рецептора Fc (FcR) — опосредованные эффекторные функции антител, включая антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC), в предотвращении приобретения вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) и в постинфекционном контроле вирусемии.Следовательно, понимание молекулярной основы эпитопов Env, которые составляют эффективные мишени ADCC, представляет фундаментальный интерес для гуморального иммунитета против ВИЧ-1 и для дизайна вакцины против ВИЧ-1. Значительная часть эффекторной функции FcR потенциально защитных антител против ВИЧ-1 направлена ​​на ненейтрализующие переходные CD4-индуцируемые (CD4i) эпитопы, связанные с gp41-реактивной областью gp120 (эпитопы кластера A). Наши предыдущие исследования определили A32-подобный эпитоп в области кластера A и сопоставили его с высококонсервативными и мобильными слоями 1 и 2 внутреннего домена gp120 в областях C1-C2 gp120.Здесь мы выясняем дополнительные структуры эпитопа кластера A, включая A32-подобный эпитоп, распознаваемый человеческим моноклональным антителом (MAb) N60-i3, и гибридный A32-C11-подобный эпитоп, распознаваемый MAb JR4 макака-резуса. Эти исследования впервые определяют гибридный A32-C11-подобный эпитоп и сопоставляют его с элементами как A32-подобного субрегиона, так и семислойного β-листа gp41-интерактивной области gp120. Эти исследования предоставляют дополнительные доказательства того, что эффективная антителозависимая эффекторная функция в области кластера A зависит от точного нацеливания на эпитоп — комбинации следа эпитопа и способа прикрепления антитела.Все вместе эти находки помогают глубже понять, как эпитопы кластера A нацелены на гуморальные ответы.

    ВАЖНОСТЬ ВИЧ / СПИД унес жизни более 30 миллионов человек. Хотя антиретровирусные препараты могут контролировать репликацию вируса, вакцина для предотвращения распространения болезни еще не разработана. Исследования естественной инфекции ВИЧ-1, обезьяньего вируса иммунодефицита (SIV) или обезьяньего вируса иммунодефицита человека (SHIV), нечеловеческих приматов (NHP), и моделей гуманизированных мышей, инфицированных ВИЧ-1, исследования пассивного переноса у младенцев, рожденных от ВИЧ -инфицированных матерей и клиническое испытание RV144 связали опосредованные FcR эффекторные функции анти-ВИЧ-1 антител с постинфекционным контролем виремии и / или блокированием передачи вируса.В этом отчете мы даем дополнительное определение молекулярных детерминант взаимодействия антигена Env, которые приводят к эффективной антителозависимой эффекторной функции, направленной на ненейтрализующие CD4-зависимые эпитопы в gp41-реактивной области gp120. Эти результаты имеют важное значение для разработки эффективной вакцины против ВИЧ-1.

    ВВЕДЕНИЕ

    Антитела (Abs) должны связывать консервативные домены на гликопротеинах вирусной оболочки (Env) во время ключевых моментов ретровирусной репликации, чтобы обеспечить широкую защиту от инфекции вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1).Их вклад в защиту может быть результатом множества противовирусных механизмов, включая прямую нейтрализацию вируса и зависимых от Fc рецепторов эффекторных функций, таких как антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC) или опосредованный антителами фагоцитоз (1, –4). Антитела, которые непосредственно нейтрализуют ВИЧ, могут обеспечивать защиту, что подтверждается несколькими исследованиями на приматах, не относящимися к человеку, с пассивно переносимыми моноклональными антителами (MAb) (5, –8), хотя их роль в предотвращении естественной передачи ВИЧ остается неоднозначной (см. Ссылку 9).С другой стороны, все больше данных указывает на то, что прямая нейтрализующая активность не является абсолютным требованием для гуморальной защиты от ВИЧ-инфекции. Испытания вакцины RV144 на людях (10, –13), испытания вакцины на нечеловеческих приматах (14, –17), ранние исследования пассивной иммунизации против вируса иммунодефицита обезьян (SIV) с использованием поликлональных сывороток (18, 19) и передача грудного молока исследования пар мать-младенец (20, 21) связали эффекторные функции, опосредованные рецептором Fc, с контролем или предотвращением инфекции, часто в отсутствие нейтрализации.Наконец, вклад эффекторных функций Fc в блокирование проникновения вируса, подавление виремии и терапевтическая активность нескольких различных антител, широко нейтрализующих Env (bnAbs), недавно был подтвержден как на мышиной модели проникновения ВИЧ-1, так и на модель терапии, опосредованной MAb, с использованием гуманизированных мышей, инфицированных ВИЧ-1 (22). В целом, эти результаты предполагают, что вакцина, способная вызывать как нейтрализующие, так и не нейтрализующие гуморальные реакции, обеспечит самую широкую меру защиты на уровне популяции.

    В то время как нейтрализующие эпитопы были изучены очень подробно (23, -34), относительно мало известно об эпитопах, которые являются мишенями для антител, действующих посредством зависимых от рецептора Fc эффекторных функций, их степени перекрытия с нейтрализующими эпитопами, иммунологических правилах. лежащий в основе их отбора во время ответов антител против Env, или их точный локус действия (например, блокирование передачи или постинфекционный вирусный контроль). Хотя нейтрализация и зависимые от рецептора Fc процессы антител могут совпадать для данной специфичности, как сообщалось для антител, нацеленных на вариабельные петли gp120, сайт связывания корецептора или область петли V2 (35, -38), они также могут быть диссоциированным.Известны эпитопы как на gp120, так и на gp41, на которые нацелены антитела, не обладающие нейтрализующей активностью, но способные к мощной Fc-опосредованной эффекторной функции (см. Ссылки 37 38). В этой группе ненейтрализующие, CD4-индуцируемые (CD4i) эпитопы в C1-C2 области gp120 (A32-подобные эпитопы) недавно привлекли большое внимание как мощные мишени для ADCC (39, –42). Анализ RV144 показал, что эта область gp120 является мишенью для ответов ADCC, которые коррелируют со снижением инфекции. Кроме того, у вакцинированных субъектов был выделен ряд MAb, специфичных для A32-блокируемых эпитопов (43), которые опосредовали активность ADCC перекрестной кладки и синергизированы с V2-специфическими MAb для опосредования ADCC против изолята AE уровня 2.CM235 (44). Наконец, защитная эффективность вакцины, обусловленная ответами ADCC на С1-регион-специфические МАb, была значительно ослаблена присутствием IgA МАb, неспособных к эффекторной функции, опосредованной NK-клетками, но конкурирующих за те же сайты связывания Env (45).

    Ранее мы обозначили эпитопы C1-C2, отображающие gp41-реактивную поверхность gp120 кластера A, каноническими примерами являются MAb A32 и C11 (41). Эти эпитопы обнажаются после того, как тримеры оболочки взаимодействуют с CD4 клетки-мишени, и сохраняются на поверхности только что инфицированных клеток в течение длительных периодов времени после инфицирования (46, –48).Они также обнаруживаются на поверхности постоянно инфицированных клеток. В общем, эпитопы кластера A являются естественными иммуногенами, поскольку ВИЧ-1-инфицированные люди часто вырабатывают специфичные для C1-C2 антитела (39, 40, 42, 49). Мы вместе с другими показали, что эти эпитопы становятся основными мишенями для ответов ADCC во время инфекции ВИЧ-1 (39, 41, 42, 50), и ответы ADCC на эту область также подвержены иммунному бегству на ранних этапах инфекции (51). Недавно было также показано, что воздействие эпитопов кластера A модулируется подавлением CD4 на поверхности инфицированной клетки-мишени факторами хозяина Nef и Vpu (42, 52).Это указывает на возможность развития Nef и Vpu в качестве вирусной защиты от воздействия этих эпитопов-мишеней во время высвобождения вириона и в качестве механизма уклонения ADCC, предотвращающего опосредованное антителами очищение инфицированных вирусом клеток (42, 52).

    Мы ранее сообщали, что кластер A состоит по крайней мере из трех субрегионов эпитопа, как определено с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), конкуренция с MAb A32 и C11 за связывание с gp120, запускаемым CD4 (41). Одна подгруппа конкурирует только с A32 (A32-подобные эпитопы), вторая конкурирует только с C11 (C11-подобными эпитопами), а третья конкурирует как с A32, так и с C11 (гибридные A32-C11-подобные эпитопы).Недавно мы определили субрегион A32-подобного эпитопа на атомном уровне, описав структуры Fab-фрагментов двух A32-подобных антител в комплексах с ядрами gp120, запускаемыми CD4 (53). Эти исследования картировали A32-подобный эпитоп на мобильные слои 1 и 2 внутреннего домена gp120 в областях C1-C2. Они также указали на роль точного нацеливания на эпитоп и способа связывания антител в Fc-опосредованных эффекторных функциях антител против ВИЧ-1. Здесь мы выясняем еще две эпитопные структуры в области кластера А и обеспечиваем более полное понимание того, как эти эпитопы распознаются человеческим MAb и MAb макака-резуса, оба из которых способны выполнять мощную функцию ADCC.

    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

    Очистка белков.

    Моноклональные антитела (MAb)

    JR4 и N60-i3 очищали хроматографией на колонке HiTrap с белком A (GE Healthcare) из супернатантов 293T, полученных путем трансфекции плазмид, несущих гены тяжелой и легкой цепей соответствующих Abs. Fab обоих MAb получали из очищенных IgG (10 мг / мл) протеолитическим расщеплением с иммобилизованным папаином (Pierce, Rockford, IL) и очищали с использованием колонки с протеином A для удаления Fc (GE Healthcare, Piscataway, NJ). с последующей гель-фильтрационной хроматографией на колонке Superdex 200 16/60 (GE Healthcare, Piscataway, NJ).Пик элюирования каждого из Fab соответствовал молекулярной массе приблизительно 50 кДа, и его собирали и концентрировали для использования в испытаниях по кристаллизации.

    Для кристаллографических исследований белок gp120 с расширенным ядром (ядро e ) штамма 93TH057 клады A / E (gp120 93TH057 core e ; gp120 без N- и C-концов и переменных петель 1, 2 и 3 [V1V2V3]) и CD4-миметический минипротеин M48 (F 23 M47) или M48U1 (54, 55) были использованы для получения тройных комплексов JR4 и N60-i3 соответственно.gp120 93TH057 core e получали и очищали, как описано ранее (53). Дегликозилированный gp120 93TH057 core e сначала смешивали с CD4-миметическим пептидом M48 или M48U1 в молярном соотношении 1: 1,5 и очищали гель-фильтрационной хроматографией на колонке Superdex 200 16/60 (GE Healthcare, Piscataway, NJ ). После концентрирования комплекс gp120 93TH057 core e -M48 или gp120 93TH057 core e -M48U1 был смешан с 20% молярным избытком JR4 Fab или N60-i3 Fab, соответственно, и снова пропущен через колонка для гель-фильтрации, уравновешенная 25 мМ трис-HCl буфером, pH 7.2, с 0,35 M NaCl для комплекса JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 и с 0,15 M NaCl для комплекса N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1. Очищенные комплексы концентрировали до ~ 10 мг / мл для экспериментов по кристаллизации.

    Кристаллизация.

    Первоначальные кристаллические экраны были выполнены в роботизированных испытаниях диффузии пара в режиме сидя-капля с использованием коммерчески доступных решеток для кристаллизации с разреженной матрицей, а затем воспроизведены и оптимизированы с использованием метода диффузии пара висячей капли (капли 0.5 мкл белка и 0,5 мкл раствора-осадителя, уравновешенного 700 мкл резервуарного раствора). Кристаллы JR4 Fab были получены из раствора, содержащего 0,2 М сульфата аммония, 1,0 М тригидрат какодилата натрия, pH 6,5 и 30% (мас. / Об.) Полиэтиленгликоля (PEG) 5000. Перед замораживанием кристаллы переводили в кристаллизатор. раствор, содержащий 15% (об. / об.) глицерина. Кристаллы JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 были выращены из 16,6% ПЭГ 400,13.3% PEG 3350, 0,1 M MgCl 2 и 0,1 M Tris (pH 8,5) и вымачивали в маточном растворе с добавлением 20% 2-метил-2,4-пентандиола (MPD) перед замораживанием для сбора данных. Кристаллы N60-i3 Fab-gp120 93TH057 -M48U1 выращивали в 10–16% PEG 8000 или PEG 10000, 0,065 M NaCl и 0,1 M Tris-HCl (pH 8,5) при 22 ° C и подвергали криозащите в 18% MPD. , 16% ПЭГ 8000 или 10000, 0,1 М трис-HCl (pH 8,5) и 0,065 М хлорид натрия.

    Решение для сбора и структурирования данных.

    Дифракционные данные были собраны на Стэнфордском источнике синхротронного излучения (SSRL) на линиях пучка BL9-2 (JR4 Fab), BL12-2 (JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48) и BL7- 1 (N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1), оснащенный детекторами площади MAR325, Pilatus 6M PAD и ADSC Quantum 315 соответственно.Все данные были обработаны и обработаны с помощью HKL2000 (56). Структуры были решены путем молекулярной замены Phaser (57) из набора CCP4 (58) на основе координат gp120 (номер доступа PDB 3TGT) и Fab N5-i5 (PDB 4H8W) и координат CD4-миметического пептида M48. (PDB 4K0A) и M48U1 (PDB 4JZW). Уточнение проводили с помощью Refmac (59) и / или Phenix (60). Доработка сочеталась с ручной переоборудованием и восстановлением с помощью COOT (61). Статистика сбора и уточнения данных представлена ​​в.

    ТАБЛИЦА 1

    Статистика сбора и уточнения кристаллографических данных

    8 , b, c (Å) 3,17 (3,23–3,17) 9044 92,4570 96613 % бесплатно 1.1
    Параметр Значение для: a
    Fab N60-i3-gp120 9206 9206 9206 9201 9201 920 920 920 920 93TH0 Fab JR4 Fab JR4-gp120 93TH057 ядро ​​ e -M48
    Сбор данных
    1 Длина волны (Å)127 1.045 1.127
    Пространственная группа P2 (1) 2 (1) 2 P1 P2 (1)
    Параметры ячеек 98,3, 102,6, 108,0 79,4, 79,6, 82,0 110,3 77,8 127,6
    α, β, γ (°) 90, 90, 90 78,8, 82,9 , 65,2 90, 114,3, 90
    No.молекул / ед. b 4 8 8
    Разрешение (Å) 50–3,20 (3,26–3,20) 50,0–1,91 (1,95–1,91)
    Кол-во отражений
    Всего 66,561 220,077 145,898
    Уникальный
    R merg (%) c 12.6 (89,9) 12,5 (60,1) 25,2 (87,1)
    I / σ 10,7 (1,3) 7,35 (1,5) 6,9 (1,4)
    Полнота (%) ) 93,7 (96,0) 93,6 (95,5) 99,8 (100)
    Избыточность 3,8 (3,8) 1,7 (1,6) 3,7 (3,7)
    Статистика уточнения
    Разрешение (Å) 36.01–3,2 40,2–1,91 45,0–3,21
    R (%) d 22,0 19,2 27,3
    27,7 24,6 33,2
    Кол-во атомов
    Протеин 6,010 12,736 12449 9044
    Лиганд 158 25 278
    Общее значение B (Å 2 )
    21,1 94,6
    Вода 44,1 29,6
    Кол-во лигандов / No. ионов 112,0 40,9 96,7
    Среднеквадратичное отклонение
    Длина связки (Å) 0,007
    Угол соединения (Å) °) 1.41 1,77 1,48
    Участок Рамачандрана f
    Избранное (%) 72,98 24,0 9,1 9,3
    Выбросы (%) 3,1 0,5 0,5

    Проверка и анализ структуры.

    Качество финальных доработанных моделей контролировали с помощью программы MolProbity (62). Структурное выравнивание проводилось с помощью сервера Dali и программы lsqkab из пакета CCP4 (58). Веб-серверы PISA (63) и PIC (64) использовались для определения контактных поверхностей и остатков. Все иллюстрации были подготовлены с помощью пакета молекулярной графики PyMol (http://pymol.org) (DeLano Scientific, Сан-Карлос, Калифорния, США).

    Конкурентный анализ FRET-FCS.

    Alexa 488-Alexa 568 донорно-акцепторных пар использовали для конкурентных анализов с использованием флуоресцентной резонансной передачи энергии (FRET) -флуоресцентной корреляционной спектроскопии (FCS).Для измерений FRET Fab (C11, A32, N60i3 и JR4) метили либо донорными (Alexa 488), либо акцепторными (Alexa 568) зондами (набор для мечения MAb Invitrogen). Вкратце, реактивный краситель Alexa Fluor 488 или 568 имеет фрагмент сукцинимидилового эфира, который эффективно взаимодействует с первичными аминами Fab с образованием стабильных конъюгатов краситель-белок. Меченые красителем Fab очищали с использованием спин-колонок с отсечкой 10 кДа. Очищенный Fab, меченный Alexa 488 или 568, количественно определяли с помощью спектрометра УФ-видимого света (УФ-Вид) (NanoDrop 2000).Отношение красителя к белку определяли путем измерения оптической плотности при 280 нм (белок) по сравнению с 488 или 577 нм (краситель). Отношение красителя к белку составляло от 1 до 2. Мы специально стремились сохранить этот низкий уровень мечения красителя, поскольку мы использовали метод флуоресценции одной молекулы, чтобы минимально нарушить функциональность белка. Измерения FRET проводили в конфокальном микроскопе (MicroTime 200; PicoQuant). Программное обеспечение PicoQuant Symphotime использовалось для создания гистограмм FRET и дальнейшего анализа.Измерения FRET проводили после того, как иммунный комплекс с одноцепочечным полноразмерным gp120 BaL -растворимым CD4 (sCD4) (FLSC; gp120 BaL — gp120 изолята BaL ВИЧ-1) был сформирован с меченным донором Fab и меченный акцептором Fab. Во всех наших измерениях концентрация каждого Fab составляла 1 мкг / мл, а концентрация FLSC составляла 1,5 мкг / мл. Иммунные комплексы получали путем инкубации Fab с FLSC при 20 ° C в течение 1 часа. Отклики флуоресценции от донорных и акцепторных молекул разделялись светоделителем 50/50 и детектировались двумя лавинными фотодиодными детекторами (APD) с использованием метода коррелированного по времени однофотонного счета и временного разрешения (TTTR). режим платы PicoHarp 300.Для регистрации донорной и акцепторной флуоресценции в двух отдельных каналах детектирования использовались высококачественные полосовые (Chroma) фильтры. Собранные однофотонные данные были разделены по ячейкам длительностью 1 мс в каждом канале (донор или акцептор), что привело к кривым зависимости интенсивности от времени и гистограммам скорости счета. Пороговые значения в каждом канале использовались для идентификации всплесков одиночных молекул по соответствующему уровню фонового сигнала. Всплески флуоресценции регистрировались одновременно в донорных и акцепторных каналах, а эффективности FRET рассчитывались с использованием E = I A / ( I A + γ I D ), где I D и I A — это суммы подсчетов доноров и подсчетов акцепторов для каждого пакета, соответственно, с учетом возможной разницы в значениях эффективности обнаружения (γ) в двух отдельных каналах (65).Расстояние донор-акцептор ( r ) с точки зрения эффективности передачи энергии ( E ) и расстояния Ферстера ( R 0 ) определяется как r = R 0 ( 1 / E 1 ) 1/6 . Мы использовали значение R 0 62 Å для пары Alexa 488 (донор) и Alexa 568 (акцептор) для оценки расстояний от донора до акцептора. В дополнение к измерениям FRET мы также выполнили измерения FCS для оценки связывания in vitro одного или нескольких Fab-фрагментов с FLSC.Мы определили коэффициенты трансляционной диффузии Fab-фрагментов, меченных Alexa 488 или 568, и соответствующих иммунных комплексов на основе измерений FCS. Измерения и анализ FCS были выполнены, как сообщалось ранее (47).

    Анализ конкуренции SPR.

    Следы связывания MAb N60-i3 и JR4 по отношению к MAb C11 и A32 оценивали по конкуренции поверхностного плазмонного резонанса (SPR) на Biacore T-100 (GE Healthcare) при 25 ° C с буфером HBS-EP (0,01 M HEPES, pH 7,4, 0.15 М NaCl, 3 мМ ЭДТА и 0,05% ПАВ Р-20). Белок A сначала был иммобилизован на второй из двух проточных ячеек на чипе CM5 до ~ 3000 единиц ответа (RU), а первая проточная ячейка была заблокирована стандартным протоколом связывания с амином (GE Healthcare). Затем подлежащие оценке IgG захватывали во вторую проточную кювету, пропуская 5-10 нМ раствор MAb при скорости потока 10 мкл / мин в течение 30 с. Концентрацию антител варьировали, чтобы получить RU в диапазоне от 150 до 400. Одноцепочечный комплекс gp120 BaL -sCD4 (FLSC) (66) затем пропускали через ту же проточную кювету со скоростью потока 10 мкл / мин в течение 30 с.Концентрация FLSC была выбрана так, чтобы получить RU в диапазоне от 150 до 400, что сравнимо с RU для антитела. Затем различные концентрации MAb Fab пропускали через обе проточные кюветы со скоростью потока 30 мкл / мин в течение 200 с и позволяли диссоциировать, пропуская буфер через обе ячейки с той же скоростью потока в течение 800 с. Клетки регенерировали между концентрациями с помощью 30-секундной инъекции 0,1 М глицина, pH 3,0, при скорости потока 100 мкл / мин. Затем антитело и FLSC повторно загружали во вторую проточную кювету для следующей концентрации.Пустые сенсограммы получали путем инъекции буфера HBS-EP вместо Fab. Сенсограммы серии концентраций (проточная кювета две минус проточная кювета одна) были скорректированы с использованием соответствующего бланка.

    Анализы ADCC.

    Анализы

    ADCC проводили с использованием метода быстрой флуоресценции ADCC (67), модифицированного для уменьшения эффектов прозоны. Во всех исследованиях ADCC использовались клетки-мишени CEM-NKr-CCR5, сенсибилизированные рекомбинантным gp120 из изолята ВИЧ-1 BaL (HIV-1 BaL ) или спинокулированные инактивированным AT-2 вирусом BaL ВИЧ-1 (любезно предоставлены Джеффри Лифсоном, Национальный институт рака) при 3000 об / мин в течение 2 ч при 12 ° C.Затем сенсибилизированные gp120 или спинокулированные вирусом клетки дважды промывали и добавляли в 96-луночный планшет с V-образным дном (5000 клеток / лунку). Сенсибилизированные gp120 или связанные с вирионом клетки-мишени инкубировали с разведениями MAb в течение 15 мин и промывали культуральной средой перед добавлением мононуклеарных эффекторных клеток периферической крови от здоровых доноров в конечном соотношении 50: 1. Эффекторные клетки и клетки-мишени осаждали центрифугированием и инкубировали в течение 2-3 ч при 37 ° C с последующей фиксацией и цитолизом, определяемыми проточной цитометрией, как описано у Gomez-Roman et al.(67). Значения абсолютной цитотоксичности были нормализованы с использованием MAb C11, как описано ранее (41).

    Номера доступа к структуре белка.

    Структуры Fab N60-i3-gp12093TH057-M48U1, Fab JR4 и Fab JR4-gp12093TH057-M48 были депонированы в банке данных белков с кодами доступа 4RFO, 4RFE и 4RFN, соответственно.

    РЕЗУЛЬТАТЫ

    Определение происхождения МАb и кластера эпитопа А.

    MAb N60-i3 было выделено из В-клеток ВИЧ-1-инфицированного индивидуума и охарактеризовано по начальной реактивности с использованием рекомбинантных белков на основе изолята BaL ВИЧ-1, как описано ранее для других MAb кластера A (41).MAb JR4 получали из В-клеток периферической крови макаки-резуса, инфицированной мутантом KB9 вируса иммунодефицита обезьян (SHIV) с делециями сайтов гликозилирования в gp41. Подробное описание MAb N60-i3 и JR4, выделения JR4, использования гена зародышевой линии и степени соматической гипермутации будет опубликовано в другом месте. MAb N60-i3 и JR4, как и другие CD4-индуцируемые (CD4i) MAb кластера A (41), демонстрируют преимущественное связывание с комплексами gp120-CD4 по сравнению с мономерным gp120 и отсутствие связывания с тримерами Env, экспрессируемыми на поверхности клетки в присутствии или отсутствие растворимого CD4 (sCD4; домены d1 d4 CD4) (см. рис.S1 в дополнительном материале) (47, 48, 53). Доступ к начальному назначению эпитопов осуществлялся на основе конкуренции связывания N60-i3 и JR4 с одноцепочечным комплексом gp120 BaL -sCD4 (FLSC) (66) с помощью MAb A32 и C11, двух антител, специфичных для различных (неперекрывающихся) эпитопов в область кластера A (41). Недавно мы определили эпитопы в A32-подобной области, описав эпитопные структуры двух A32-подобных MAb, N5-i5 и 2.2c, и картировали их в C1-C2 области gp120 (53). В отличие от этого, сайт связывания для MAb C11 все еще не определен, но он был картирован с семицепочечным β-сэндвичем gp120 и остатком на удлиненном С-конце gp120 с помощью исследований мутагенеза (68).Чтобы точно получить доступ к конкуренции из-за перекрытия следов эпитопов и исключить возможность эффектов авидности или стерических столкновений за пределами границы связывания антиген-антитело, мы разработали новую конкуренцию на основе флуоресцентной резонансной спектроскопии переноса энергии и корреляции флуоресценции (FRET-FCS). анализ, в котором антигенсвязывающие фрагменты (Fab) тестируемых антител конкурируют в растворе за связывание с антигеном Env (). Кроме того, мы также протестировали способность MAb A32 и C11 блокировать связывание Fab N60-i3 и JR4 с FLSC в конкурентном анализе SPR (69) ().Показаны гистограммы FRET пар Fab, помеченных Alexa 488 (A488) или Alexa 568 (A568) MAbs N60-i3, JR4, A32 и C11, связанных с FLSC. При тестировании связывания Fab C11-A488 и Fab A32-A568 данные могут быть хорошо согласованы с профилем Гаусса, показывающим эффективность FRET ~ 20% (), что четко подтверждает сосуществование Fab-фрагментов A32 и C11, связанных с одной молекулой белка FLSC. со стехиометрией C11 / A32 / FLSC 1: 1: 1. Аналогичный профиль FRET наблюдался для связывания Fab C11-A488 и N60-i3-A568 Fab с FLSC с эффективностью FRET ~ 18% (), подтверждая, что Fab C11 и Fab N60-i3 связываются с неперекрывающимися эпитопами FLSC.Кроме того, средняя эффективность FRET переводится в среднее расстояние 78 Å между Fab-фрагментами C11 и A32 и расстояние 79,8 Å между Fab-фрагментами C11 и N60-i3. Важно отметить, что Fab не мечены флуоресцентно в определенном положении; следовательно, расстояние, полученное из наших измерений FRET, представляет собой среднее значение между зондами эпитопа, меченными донорами и акцепторами. Однако связывание зондов эпитопа с FLSC дополнительно подтверждается коэффициентами диффузии, полученными из измерений FCS.Напротив, при анализе связывания Fab C11-A488 и Fab JR4-A568 () эффективность FRET была ниже 10%, и нельзя было получить гауссовское распределение. Автокорреляционные измерения в канале C11 также показали наличие (25%) несвязанного C11. Это указывает на то, что JR4 Fab, в отличие от N60-i3 Fab, способен частично блокировать связывание C11 Fab с антигеном FLSC. С другой стороны, в одном и том же анализе как N60-i3 Fab, так и JR4 Fab блокировали связывание A32 Fab с FLSC, на что указывает отсутствие сигнала FRET для смесей A32-A488, N60-i3-A568-FLSC и A32-A488 JR4-A568 Fab-FLSC (и).Данные о конкуренции FRET-FCS хорошо согласуются с результатами анализа конкуренции SPR. При связывании A32 IgG с FLSC ни ​​N60-i3, ни JR4 Fab не могли связываться, что свидетельствует о полной конкуренции за один и тот же сайт связывания на FLSC. С C11 IgG, связанным с FLSC, N60-i3 Fab также может связываться с очевидной K D (константа равновесной диссоциации), аналогичной константе связывания N60-i3 только с FLSC, что свидетельствует об отсутствии перекрытия в сайтах связывания. A32 Fab показал аналогичный результат с C11 IgG, связанным с FLSC.Однако с C11 IgG, связанным с FLSC, кажущееся K D JR4 было примерно в 38 раз ниже, чем у JR4, связывающегося только с FLSC, что свидетельствует о частичном перекрытии их сайтов связывания (2). В целом эти данные предполагают, что MAb N60-i3 распознает A32-подобный эпитоп, тогда как MAb JR4 может распознавать гибридный эпитоп A32-C11.

    Гистограммы FRET меченных донором (A488) Fab, акцепторных (A568) Fab и полноразмерных одноцепочечных gp120 BaL -CD4 комплекса (FLSC) в растворе, как определено методом FRET-FCS (см. Материалы и методы для подробностей).Данные на панелях A и B указывают на эффективность FRET ~ 20% для меченных A488 Fab C11 и Fab A32, меченных A568 или Fab N60-i3, связанных с FLSC, соответственно. Панели D и E не показывают обнаруживаемые сигналы FRET для A488-меченного A32 Fab и A568-меченного N60-i3 Fab или JR4 Fab в присутствии FLSC в растворе. По измерениям FCS коэффициент диффузии Fab, меченного красителем, составляет ∼83 мкм 2 / с. Эта диффузия значительно снизилась после связывания двух Fab с FLSC. Коэффициент диффузии этого иммунного комплекса составляет ∼36 мкм 2 / с.

    Конкуренция MAb A32 / C11 за связывание N60-i3 / JR4 Fab, измеренная с помощью анализа конкуренции на основе поверхностного плазмонного резонанса. MAb A32 (A и B) и MAb C11 (B, C и D) были иммобилизованы на чипе с протеином A, и антиген FLSC был загружен для образования конкурентного комплекса антитело-антиген. Были протестированы различные концентрации Fab MAb. Затем через микросхему пропускали N60-i3 (A и C), JR4 (B и D) и A32 (E). (F) Показаны сенсограммы серии концентраций. Сродство связывания MAb A32, N60-i3 и JR4 с FLSC в отсутствие (синие столбцы) и в присутствии (красные столбцы) C11 IgG рассчитывали с помощью программного обеспечения BIAevaluation.

    MAb N60-i3 и JR4 проявляют сильную активность ADCC.

    Мы протестировали ADCC-активность MAb N60-i3 и MAb JR4 с использованием клеток-мишеней CEM-Nkr-CCR5, сенсибилизированных gp120 () или инактивированными AT-2 вирионами BaL () изолята ВИЧ-1 BaL , как описано в разделе «Материалы и методы». MAb N60-i3 и JR4 являются мощными медиаторами ADCC в обоих форматах анализа с использованием критериев эффективности, описанных ранее (41).

    Типичные кривые ADCC для MAb N60-i3 и JR4. Анализы ADCC выполняли, как описано в разделе «Материалы и методы», с использованием клеток-мишеней CEM-NKr-CCR5, сенсибилизированных gp120 изолята ВИЧ-1 BaL (A) или спинокулированных AT-2-инактивированными вирусами BaL (B).MAb паливизумаб (Synagis; MedImmune, Inc.) было включено в качестве контроля.

    Структуры антигенных комплексов MAb N60-i3- и JR4-Env.

    В попытке выяснить эпитопы MAb N60-i3 и JR4 и различия в эпитопных следах, если таковые имеются, которые могли бы объяснить различия в их перекрестной конкуренции A32 / C11, мы определили кристаллические структуры комплексов, образованных между их антигенами. -связывающие фрагменты (Fab) и CD4-запускаемый антиген gp120. Оба комплекса были сформированы с использованием удлиненного корового белка gp120 (остатки с 44 по 492 с удаленными петлями V1V2V3) (27) изолята клады A / E 93TH057 (gp120 93TH057 core e ) и миметика пептида CD4 M48U1 (54) (Комплекс N60-i3) или M48 (комплекс JR4).His 375 gp120 93TH057 core e в N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 комплекс был преобразован в Ser для размещения лигандов, таких как M48U1, которые проникают в полость 43 gp120 P ранее (70). M48U1 является производным M48 и идентичен, за исключением того, что фенилаланин в положении 23 был заменен фенилциклогексилметоксигруппой, увеличивая его сродство к gp120 примерно в 10 или более раз, исходя из эффективных концентраций 50% (EC 50 с), в зависимости от используемого штамма ВИЧ-1 (54).Сборка N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 кристаллизовалась в пространственной группе P2 (1) 2 (1) 2 с одним комплексом в асимметричной единице (). Сборка JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 кристаллизовалась в пространственной группе P2 (1) с двумя почти идентичными копиями комплекса, присутствующими в асимметричной единице (см. Рис. S2 в дополнительном материале). Структуры были решены путем молекулярного замещения с разрешением 3,2 Å для комплекса N60-i3 Fab и 3,21 Å для комплекса JR4 Fab и уточнены до конечного R / R из 22.0 / 27,7% и 27,3 / 33,2% соответственно. Статистика сбора и уточнения данных для структур обобщена в, а общие структуры комплексов показаны в.

    Кристаллические структуры N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 и JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 комплекса. Комплексы показаны в виде ленты (правые панели) или молекулярная поверхность отображается над молекулами Fab (левые панели), при этом легкая / тяжелая цепь Fab N60-i3 и JR4 Fab показана светло-зеленым / темно-зеленым и светло-голубым / темно-голубой соответственно.Определяющие комплементарность области (CDR) показаны серым (CDR L1), черным (CDR L2), серым (CDR L3), зеленым (CDR h2), оранжевым (CDR h3) и розовым (CDR h4) цветом (CDR h4). Внешний домен gp120 показан малиновым цветом, а внутренний домен показан пшеничным цветом (левые панели) или окрашен в многоуровневую цветовую схему (правые панели), с семинитевым β-сэндвичем пурпурным цветом, слой 1 — желтым, слой 2 — голубым, а слой 3 — светлой пшеницей. Миметические пептиды M48U1 и M48 показаны фиолетовым цветом.

    Комплексные структуры N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 и JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 показали, что как MAb N60-i3, так и MAb JR4 связываются в основном на перекрывающихся сайтах. область C1-C2 gp120, как было показано ранее, распознается A32-подобными MAb N5-i5 и 2.2с (53). В обоих случаях конформационный эпитоп образуется путем соединения мобильных слоев 1 и 2 внутреннего домена gp120 с участием остатков α0- и α1-спиралей, β2̄-, β1̄- и β4-цепей и β2̄-α0- , β1̄-β0- и β4-β5-соединительные катушки (). Интерактивная поверхность, которая становится погребенной из-за N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e , взаимодействие охватывает 1,464 Å 2 (770 Å 2 вносит Fab и 694 Å 2 от gp120) (см. Таблицу S1 в дополнительном материале) и составляет примерно половину (63%) скрытой поверхности (BSA) интерфейса JR4 Fab-gp120 93TH057 core e (BSA 2340 Å 2 с 1145 Å 2 погребенных Fab и 1,195 Å 2 , погребенный gp120) (см. Таблицу S1).Несмотря на различия в площадях поверхности, скрытых на границах раздела комплексов N60-i3 и JR4, эти антитела демонстрируют одинаковое сродство к gp120 в CD4-связанной конформации, что подтверждается анализом SPR (см. Рис. S1 в дополнительном материале) и изотермическим титрационная калориметрия (ITC) (см. рис. S3). Террейны паратопа Fab N60-i3 и JR4 являются плоскими и электроположительными, с единственными выступающими областями, которые вносят определяющие комплементарность участки (CDR) тяжелых цепей 1 и 3 (CDR h2 и CDR h4) соответственно, создавая контакты с α1-спираль слоя 2.В обоих комплексах тяжелая цепь составляет большую часть поверхности связывания Fab (приблизительно 85% и 83% BSA Fab N60-i3 и Fab JR4, соответственно), причем все три CDR (CDR h2-h4) участвуют во взаимодействии ( см. Таблицу S1 в дополнительном материале). CDR h4 из 12 и 14 остатков для N60-i3 и JR4, соответственно, обеспечивают большую часть их БСА тяжелой цепи (приблизительно 57% и 44%, как рассчитано для N60-i3 и JR4, соответственно) (см. Таблицы S1 и S2 и рис. S4 в дополнительном материале).В обоих случаях вклад легкой цепи в интерфейс антитело-антиген минимален, только две CDR (CDR легкой цепи 1 [L1] и CDR L3 для N60-i3 и CDR L1 и CDR L2 для JR4) участвуют в связывании. (; см. также рис. S4). На границах раздела тяжелая цепь-gp120 93TH057 ядро ​​ e N60-i3 и JR4 образуются в общей сложности 56 (7 H-связей) и 54 (15 H-связей) контактов, как определено отсечкой 5 Å ( , правая панель). Для сравнения, легкая цепь вносит 4 контакта (0 H-связи) и 5 ​​(1 H-связь) в комплексную поверхность раздела N60-i3 и JR4, соответственно (правая панель).

    Связывание MAb N60-i3 и JR4 с антигеном gp120. Слева показаны интерфейсы N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e и JR4 Fab-gp120 93TH057 core e с молекулярными поверхностями, отображенными на молекулах gp120, и с CDR Fabs, показанными как ленты. Показаны только CDR, способствующие связыванию. Повороты на 45 ° показывают увеличенные изображения поверхностей связывания Fab и α1-спирали слоя 2. Н-связи показаны пунктирной линией синего цвета.Цвета указаны в легенде. Справа сети взаимодействий, сформированные между Fab и антигеном gp120, как определено критерием отсечки расстояния 5 Å, показаны сплошными линиями. Связи H показаны синим штрихом.

    Следы эпитопов MAb N60-i3 и JR4.

    Эпитопный след MAb N60-i3 отображается исключительно на слои 1 и 2 области C1-C2 внутреннего домена gp120. MAb JR4 в значительной степени перекрывает MAb N60-i3 в нацеленных слоях 1 и 2, но также включает контакты внутри семицепочечного β-сэндвича и С-конца gp120 ().

    Структурная основа взаимодействия МА кластера А с антигеном gp120. (A) Картирование контактных остатков N60-i3 и JR4 на первичной последовательности внутреннего домена gp120 изолята 93TH057. Схема топологии, изображающая распределение элементов вторичной структуры, показана над последовательностями gp120. Захороненные остатки выделены зеленым и синим цветом. Взаимодействия основной цепи (о), боковой цепи (+), а также боковой и основной цепи (*) показаны непосредственно над остатками, как определено критерием расстояния 5 Å, и окрашены в зависимости от типа контакта: гидрофобный, синий; гидрофильный, зеленый; или оба, черные.Остатки, образующие эпитопы N5-i5 и 2.2c, как описано в ссылке 53, обозначены синими и серыми линиями под последовательностью gp120 соответственно. (B) Следы эпитопа MAb N60-i3, JR4, N5-i5 и 2.2c. Атомы Cα остатков gp120, участвующих в связывании Fab, показаны сферами и отображены на ленточной диаграмме gp120. Отмечены выбранные остатки слоя 2 и вклад семинитевого β-сэндвича в связывание Fab, а также все остатки в α1-спирали, участвующие в связывании N60-i3, JR4 и N5-i5.(C) Сравнение связывания MAb N60-i3, JR4, N5-i5 и 2.2c с антигеном gp120, запускаемым CD4. N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48, JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 и 2.2c Fab-gp120 YU2 core e6 -M48, наложены комплексы на основе e6 -M48 на внешнем домене gp120 на N5-i5 Fab-gp120 93TH057 core e d1d2 CD4 комплекс и ориентированы относительно мембраны клетки-мишени. В обзоре 180 ° показаны только gp120 93TH057 core e и d1d2 CD4 от N5-i5 Fab-gp120 93TH057 core e d1d2 CD4-комплекс (53) с переменным весом и light (V H и V L ) домены Fab, отображаемые в виде шаров.На вставках показаны углы поворота, рассчитанные с использованием центра масс gp120 в качестве источника и среднего положения α-углерода для каркасной области 2 тяжелой цепи (остатки с 36 по 49) в качестве контрольной точки для каждого антитела (вверху) и поворота на 90 ° Вид 180 ° (внизу).

    Контакты уровня 1 (область C1 gp120).

    Слой 1 области C1 gp120 составляет большую часть контактной поверхности gp120, задействованной в связывании MAb N60-i3 и JR4 (79% и 73% BSA для N60-i3 и JR4, соответственно) (см. Таблицу S1 в дополнительном документе). материал).Контакты уровня 1 для обоих MAb аналогичны и включают остатки с 51 по 54, 60, от 68 до 69 и с 71 по 79, захороненные на границе раздела N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e и остатки от 50 до 55, 59 до 61, 68-69, 71-80 и 82 похоронены в интерфейсе JR4 Fab-gp120 93TH057 core e (). Есть две точки привязки, которые обеспечивают большую часть гидрофобной поверхности, используемой обоими антителами для прикрепления к слою 1. Они включают мотив LeuPheCys Thr 51 β2-цепи gp120 и мотив HisAlaCysValPro Thr 71 на С-конце. α0-спирали и β1-тяжи.JR4 использует CDR h2-h4 для создания гидрофобных контактов с мотивом Thr 51 LeuPheCys, тогда как контакты N60-i3 в этой области включают вклады CDR h2 и h4 (; см. Также Таблицу S2 и Рис. S4 в дополнительном материале. ). Напротив, пять CDR Fab N60-i3 (CDR h2-h4 и CDR L1 и L3) способствуют его прикреплению к мотиву Thr 71 HisAlaCysValPro, тогда как JR4 использует почти исключительно CDR h4 (с несколькими контактами между остатками каркасная область h2 [FWRh2] и CDR h2), чтобы контактировать с этой областью (правая панель; см. также таблицу S2 и рис.S4). Мотивы Leu 53 PheCys и Thr 71 HisAlaCysValPro связаны дисульфидной связью, Cys 54 с Cys 74 , соединяющей эти две точки привязки. Дисульфидная связь Cys 54 -Cys 74 играет функциональную роль в стабилизации нативной конформации gp120 и является высококонсервативной среди изолятов ВИЧ-1 во всех кладах. За исключением His 72 (97,8% консервативности по кладам), большинство остатков этих двух мотивов инвариантны более чем в 99% последовательностей ВИЧ-1, при этом некоторые из них, такие как Pro 76 и Pro 79 , инвариантны в больше 99.9% последовательностей, как определено Компендией базы данных последовательностей ВИЧ (http://www.hiv.lanl.gov). JR4 проникает в слой 1 немного длиннее, чем у N60-i3, и продолжается до края остатков слоя 1, Asn 80 , Pro 81 и Gln 82 (, правая панель и 6A).

    Контакты уровня 2 (область C1 и C2 gp120).

    MAb N60-i3 и JR4 в значительной степени перекрываются при связывании со слоем 2 (правая панель и 6A). Эти контакты вносят 21% и 16% БСА для комплексов N60-i3 и JR4, соответственно (см. Таблицу S1 в дополнительном материале).Остатки уровня 2, захороненные в ядре N60-i3 Fab-gp120 93TH057 e , включают остатки 103, 106-107, 114, 217 и 219-221, тогда как JR4 Fab-gp120 93TH057 ядро ​​ e комплекс закапывает остатки 103, 106-107, 217 и 220-2222. Остатки Gln 103 , Glu 106 и Asp 107 α1-спирали служат основными точками привязки для MAb N60-i3 и JR4. в слое 2 области C1 gp120. N60-i3 координирует эти три остатка исключительно через Arg 99 CDR h4, образуя солевой мостик с Asp 107 и множественные Н-связи с Gln 103 , а Glu 106 JR4 использует Arg 31 (CDR h2 ) для координации Asp 107 через солевой мостик и Arg 30 (FWRh2) для установления Н-связи с Glu 106 (и; см.также рис.S4 в дополнительном материале). Взаимодействие N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e также закапывает Gln 114 α1-спирали, но вклад этого остатка в связывание минимален (см. Таблицу S2). Интересно, что CDR h4 N60-i3 и CDR h2 JR4, обеспечивая контакты как с α0-спиралью слоя 1, так и с α1-спиралью слоя 2, охватывают эти два слоя и образуют единую связывающую поверхность. Этот способ межслойного прикрепления очень напоминает связывание мощного медиатора ADCC MAb N5-i5, которое использует свою CDR h3 для контакта как с α0-, так и с α1-спиралями (53).В то время как электростатические взаимодействия играют основную роль в прикреплении MAb N60-i3 и JR4 к α1-спирали, остальные связывающие контакты со слоем 2 являются преимущественно гидрофобными. Эти контакты центрируются на Tyr 217 и вокруг мотива Thr 219 ProAla β4-цепи и β4-β5-связывающей спирали gp120 (см. Также Таблицы S2 в дополнительном материале). Контактные остатки основного слоя 2, используемые N60-i3 и JR4, высококонсервативны; Gln 103 , Asp 107 и Pro 220 инвариантны при более чем 99.9% последовательностей ВИЧ-1 и Tyr 217 , Thr 219 и Ala 221 присутствуют в 99,8% последовательностей. Таким образом, MAb N60-i3 и JR4 аналогичны ADCC мощному кластеру A MAb N5-i5 (53) и нацелены на высококонсервативные элементы оболочки ВИЧ-1 в обоих слоях области C1-C2 gp120.

    Семинитевой β-сэндвич (область C2).

    Анализ следа эпитопа JR4 () показывает, что JR4 также достигает остатков в семинитевом β-сэндвиче (остатки 84, 223–224 и 246–247) и остатка 492 на С-конце gp120.Эти контакты составляют примерно 11% BSA комплекса JR4 и не присутствуют в интерфейсе N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e (см. Таблицы S1 и S2 в дополнительном материале). CDR h4 из JR4 закрепляется в этой области глубже, чем в N60-i3, и осуществляет множественные контакты с Gln 246 и Cys 247 семинитевого β-сэндвича. Кроме того, в интерфейсе JR4 Fab-gp120 93TH057 core e находятся Tyr 223 , Val 224 и Glu 492 ().Когда эпитопы N60-i3 и JR4 картированы на антигене gp120 и отображены на ленточной диаграмме ядра e gp120 (), смещение эпитопа JR4 в сторону семинитевого β-сэндвича и N- и C-концов gp120 очевидно. В анализах перекрестной конкуренции FCS-FRET и SPR MAb JR4, но не N60-i3, перекрестно конкурирует со связыванием MAb C11 с антигеном gp120 (и). Поскольку эпитопы N60-i3 и JR4 в слоях 1 и 2 в значительной степени перекрываются, мы можем предположить, что контакты JR4 с семицепочечным β-сэндвичем объясняют его гибридный фенотип и его способность перекрестно конкурировать со связыванием MAb C11 с gp120.В этом отношении эпитоп JR4 представляет собой гибридный эпитоп A32-C11 в области кластера A.

    Структурная основа активности ADCC в области кластера А.

    Недавно мы сообщили об определении A32-подобной области на атомном уровне, предоставив эпитопные следы двух человеческих A32-подобных антител, N5-i5 и 2.2c, которые специфичны для в значительной степени перекрывающихся поверхностей эпитопа в области C1-C2, но варьируются. в их способности опосредовать ADCC, причем N5-i5 в 75 раз сильнее, чем 2.2c (53).Эти исследования указали на доминирующую роль точного нацеливания на эпитопы и способа прикрепления антител в ответах ADCC, когда задействованы в значительной степени перекрывающиеся эпитопы в A32-подобной области. Было показано, что MAb N5-i5, которое взаимодействует как с α0-, так и с α1-спиралями слоев внутреннего домена 1 и 2, соответственно, лучше сшивает антиген с клетками-мишенями и более эффективно при ADCC. С другой стороны, нарушение способности 2.2c опосредовать эффективную эффекторную функцию Fc является результатом неоптимального позиционирования его домена Ch3 для взаимодействия с рецептором Fc в иммунном комплексе и плохой доступности его эпитопа для взаимодействий авидности антител, о чем судят по поверхности клетки. исследования связывания и насыщения, причем позиционирование оказывает большее влияние.Как показано на фиг.3, МА N60-i3 и JR4 представляют собой очень мощные медиаторы ADCC в области кластера A, способные выполнять Fc-зависимую эффекторную функцию против клеток-мишеней, сенсибилизированных gp120 изолята ВИЧ-1 BaL , с эффективностью, сравнимой с эффективностью MAbs A32 и C11 (41). Чтобы лучше понять структурную основу активности ADCC в области кластера A, мы сравнили эпитопные следы (и) и способы прикрепления () MAb N60-i3 и JR4 с ранее описанными мощными и более слабыми медиаторами ADCC, MAb N5- i5 и 2.2c. Как и ожидалось, сравнение выявило близкое сходство между следами эпитопов MAb N60-i3 и JR4 и следами MAb N5-i5, поскольку их эпитопы в значительной степени перекрываются в слоях 1 и 2 (). Наиболее важно, что все МА N60-i3, JR4 и N5-i5 задействуют одни и те же остатки α1-спирали для связывания, которые включают высококонсервативные остатки Gln 103 , Glu 106 и Asp 107 gp120. MAb 2.2c не контактирует с α1-спиралью и фокусирует свое связывание почти полностью на α0-спирали и слое 1.Контакты N60-i3, JR4 и N5-i5 с α1-спиралью опосредуются исключительно аргининами их тяжелых цепей (Arg 99 в CDR h4, Arg 30 и Arg 31 в CDR h2 и Arg 55 в CDR h3 N60-i3, JR4 и N5-i5 соответственно), координируя триаду Asn 103 -Glu 106 -Asp 107 через инвариантный солевой мостик и сеть Н-связей ( 53). Таким образом, для достижения α1-спирали через тяжелую цепь и нацеливания на их родственные эпитопы, N60-i3, JR4 и N5-i5 должны приближаться к антигену gp120 под одинаковыми углами и контактировать с антигеном gp120 через аналогичные контактные поверхности вариабельного домена.Хотя существуют различия в способах прикрепления между N60-i3, JR4 и N5-i5, определяемые точной ориентацией контактных поверхностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепей (V H и V L соответственно ) на gp120 все вклады тяжелых цепей находятся в очень непосредственной близости (). Используя консервативный каркас домена V H с центром масс gp120 в качестве источника, МА N60-i3 и JR4 поворачиваются в своем комплексе на 8,7 ° и 9,3 ° соответственно относительно домена V H N5. -i5.Напротив, домен V H 2.2c поворачивается на 25,5 ° относительно ориентации, определенной N5-i5. Кроме того, хотя точное положение клеточной мембраны-мишени неизвестно, на основе модели слияния клеток, как показано на рисунке, N60-i3, JR4 и N5-i5 приближаются к антигену gp120 под углом 16,2 ° или более дальше от мишени. клеточная мембрана для связывания своих эпитопов, чем 2.2c. Ранее мы показали, что эпитоп N5-i5 более доступен на поверхности клетки-мишени, чем эпитоп 2.2c, что приводит к эффективному перекрестному связыванию комплексов gp120-CD4 и мощной Fc-опосредованной эффекторной функции.Действительно, хотя исследования SPR показывают, что по существу нет различий в значениях K D между MAb N60-i3, JR4 и N5-i5 и MAb 2.2c для связывания с мономерными комплексами gp120-CD4 (FLSC) (см. Фиг. S1 в дополнительном материале) (53), при тестировании с помощью ELISA MAb 2.2c может легко перекрестно конкурировать с N60-i3, JR4 или N5-i5 (данные не показаны). Это указывает на то, что эпитоп N60-i3 / JR4 / N5-i5 более доступен для перекрестного связывания антител в формате ELISA и что его взаимодействие приводит к более стабильному комплексу эпитоп-паратоп.Кроме того, эксперименты с гибридными вариантами с взаимопревращенными ориентациями домена Ch3 показали, что способ прикрепления, определяемый относительной ориентацией его легкой и тяжелой цепей, связанных с антигеном gp120, способствует относительной импотенции 2,2c в анализах ADCC. Это не повлияло на активность ADCC N5-i5 (53). MAb N60-i3 и JR4, как и N5-i5, присоединяют свои тяжелые цепи к α1-спирали, но положения и контакты связывания gp120 их легких цепей заметно различаются ().Это предполагает, что след эпитопа и точное нацеливание на эпитоп определяют активность ADCC для N60-i3 и JR4. Направляя свои тяжелые цепи к α1-спирали, N60-i3, JR4 и N5-i5 не только более доступны для перекрестного связывания антител на клетке-мишени, но и размещают свои домены Ch3 оптимально для эффективного взаимодействия с рецептором Fc в иммунной системе. сложный. Анализ остатков, подверженных соматической мутации последовательностей зародышевой линии, показал, что N60-i3, JR4 и N5-i5 были отобраны так, чтобы иметь аргинины в положениях Arg 99 , Arg 30 / Arg 31 и Arg . 55 , соответственно, что позволяет им взаимодействовать с триадой Asn 103 -Glu 106 -Asp 107 α1-спирали.Таким образом, N60-i3, JR4 и N5-i5, по-видимому, были выбраны для специфического нацеливания на α1-спираль и распознавания эпитопа, который охватывает структуры в двух мобильных слоях внутреннего домена и использует кооперативное связывание в α0- и α1-спиралях. чтобы связать два слоя в один переплет.

    ОБСУЖДЕНИЕ

    В заключение, наши результаты показывают, что мощный ADCC в кластере A области фокусируется на высококонсервативной поверхности эпитопа, включающей α0- и α1-спирали внутренних доменов C1 и C2 областей gp120, соответственно.Область кластера A скрыта и недоступна для антител в нативных и растворимых CD4-триггерных тримерах Env ВИЧ-1 и становится доступной в вирусном спайке только после связывания с формой CD4 на клеточной поверхности, где она легко доступна для авидных взаимодействий антител. и эффективное сшивание антигенов (47, 48, 53). Кроме того, эти исследования подтверждают наше предыдущее наблюдение, что точное нацеливание на эпитоп — комбинация как следа эпитопа, так и способа прикрепления антитела — играет важную роль в определении эффективности ADCC.Кластер A MAb, способный к мощной Fc-опосредованной эффекторной функции, перекрестно связывает эпитопы на поверхности клетки-мишени, прикрепляя свои тяжелые цепи к α1-спирали gp120. Этот способ связывания позволяет позиционировать домены Ch3 для более эффективного взаимодействия с рецептором Fc.

    Эпитопы в области кластера A могут быть ограничены поверхностно-связывающимися остатками только слоев 1 и 2 (эпитоп N60-i3), а также включать в себя участие остатков семинитевого β-сэндвича (эпитоп JR4). MAb N60-i3, подобно MAb N5-i5, конкурирует за связывание с антигеном Env только с Fab A32; таким образом, его эпитоп представляет собой A32-подобный эпитоп в области кластера A.Напротив, Fab из MAb JR4 макаки-резуса полностью конкурирует за связывание A32 Fab и частично за связывание C11 Fab в анализах конкуренции ELISA, FCS-FRET и SPR. Это указывает на то, что след эпитопа JR4 на антигене gp120 включает элементы как A32-, так и C11-связывающей поверхности и представляет собой смешанный эпитоп A32-C11 области кластера A. MAb JR4 было выделено из инфицированных SHIV макак-резус, но ранее мы показали, что антитела со сходной смешанной специфичностью A32-C11 также индуцируются у ВИЧ-1-инфицированных людей (41).Это указывает на то, что смешанная специфичность A32-C11 может быть индуцирована как у нечеловеческих приматов, так и у людей после инфицирования ВИЧ-1 и SHIV, соответственно. Поскольку точный след эпитопа MAb C11 неизвестен, наши исследования впервые позволяют определить предполагаемую область контакта MAb C11 с gp120. Как показано на фиг.1, остатки gp120, ранее показанные с помощью мутагенеза, участвуют в связывании MAb C11 (68, 71), картированном на семицепочечный β-сэндвич в gp41-интерактивной области (номер доступа PDB 3JWD) (72), с N60 -i3 и JR4 Fab связываются так же, как в их CD4-запускаемых комплексах gp120.Как указывалось ранее, как N60-i3, так и JR4 связываются с gp120 в в значительной степени перекрывающихся областях, при этом только выступающая область CDR h4 JR4 присоединяется к семинитевому β-сэндвичу (). Мы предполагаем, что CDR h4 JR4, связанный с семицепочечным β-сэндвичем, препятствует связыванию MAb C11 в этой области. Остатки, показанные ранее с помощью мутагенеза для уменьшения связывания C11 с gp120, картируются в этой области. Таким образом, предполагаемый эпитоп C11 включает в себя остатки семицепочечного β-сэндвича и отображается непосредственно рядом с поверхностью A32-подобного эпитопа (вставка).Это также согласуется с нашими измерениями FCS-FRET, показывающими расстояние 79,8 Å между Fab-фрагментами C11 и N60-i3, связанными с FLSC.

    Предполагаемый сайт связывания MAb C11. Кристаллические структуры N60-i3 Fab-gp120 93TH057 core e -M48 и JR4 Fab-gp120 93TH057 core e -M48U1 накладываются на HIV-1 gp120 с gp41-интерактивной областью (код PDB 3JWD) (72). Показаны только Fab комплексов, а поверх N60-i3 Fab отображается молекулярная поверхность.CDR h4 JR4, по прогнозам, блокирующий связывание MAb C11, показан синим цветом. Остаточные контакты CDR h4 на семинитевом β-сэндвиче показаны красными сферами. Остатки, которые, как показали исследования мутагенеза, влияют на связывание MAb C11 с gp120 Env, показаны серыми сферами. На вставке показан поворот сборки на 45 °, где показаны только gp120 и CDR h4 JR4, а предполагаемый эпитоп C11 обведен красным.

    1/2 Упаковка из 5 вставок.

    Режущие инструменты Диаметр вставок для нарезания резьбы.com Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин.
    1. Home
    2. Режущие инструменты
    3. Индексируемые пластины
    4. Пластины для нарезания резьбы
    5. Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы под углом 60 градусов Внутренние 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 вставок.

    : Промышленный и научный, длина: 22 мм, частичный профиль, резьба под 60 градусов — внутренняя 22 IR N60 MXC, класс MXC — микрозернистое покрытие, длина: 22 мм, C,: Industrial & Scientific, I, 0 / 7-5 TPI , Также доступна левая рука; по запросу, 3, упаковка из 5 пластин: 1/2 ‘, I, для нержавеющих сталей и чугуна, 5-5, для свободной резки необработанных легированных сталей.Пакет из 5 пластин, 0 / 7-5 TPI,: 1/2 дюйма, 5-5, C, ниже 30HRC, 3, правая, частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов — внутренние 22 IR N60 MXC.










    Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 вставок.

    2-1 / 2-дюймовая стандартная выбиваемая матрица Greenlee 04613, диаметр 0,054 мм Режущие инструменты Kodiak с покрытием AlTiN KCT224409 Концевая фреза с микрокарбидным наконечником, изготовленная в США Шпиндель токарный инструмент 2МТ. KC303 MICHIGAN DRILL 3 / 8X3 / 32 WOODRF Key SEAT CUTR, uxcell CS16-1 M12x1.75mm Углеродистая сталь Правая рука, 2 шт. Шарикоподшипник на конце штока со шпилькой. 5 / 16-3 / 4 M8-M20 Саморезирующая головка JSN20. Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин. , Drill America 3/8, высокоскоростная стальная ручная расширительная фреза с прямой канавкой DWR, серия CTC Drill America Pilot для 1 кольцевой фрезы с твердосплавными напайками. Токарные пластины с многослойным покрытием для токарного станка, отрезного инструмента, 5 штук в упаковке QC1404 Карбидные пластины OSCARBIDE GTN-4, uxcell 0,63 дюйма x 6 дюймов Концевые фрезы со сменными пластинами 2 канавки 90 градусов BAP300R R0,8 для пластины APMT1135.1,5 мм Диаметр резания Без покрытия Яркая поверхность спирали 30 градусов Метрическая 3 мм Диаметр хвостовика Мелиновый инструмент CCMG-MM Карбидная Концевая фреза с микро квадратным носом 4 канавки Общая длина 38 мм. Затворы 18489 Шланг охлаждающей жидкости EPDM SID Черный 12,3 Длина центральной линии Внутренний диаметр 0,55 и 0,70, длина : 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI IC: 1/2 Упаковка из 5 пластин. .


    Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 пластин.

    ##

    Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин.

    и уверенность выделиться из толпы. STFND Where is The Trickle — Толстовка Navy в магазине мужской одежды, наш широкий выбор элегантен для бесплатной доставки и бесплатного возврата, дышащий и эластичный фарбик обеспечивает свободу движений и комфорт, задняя керамическая тормозная колодка DuraGo BP636 C: автомобильная, материал: пластик; Цвет: желтый, красивый аксессуар для вашего радио baofeng; Совместимая модель радио: Baofeng BF-888s Pofung 888s, ** Обработка от ультрафиолета и воды на долгие годы.Купите «С Днем отца», мама говорит, что добро пожаловать (Сердце со стрелкой), детское хлопковое пижамное платье (красный для новорожденных) и другие одеяла для сна в. ★ Легкая светодиодная вывеска (17 «В x 32» Ш x 1 «Г), идеально подходящая для рекламы или продвижения вашего бизнеса среди общественности; мгновенно увеличивайте продажи с помощью этой долговечной и надежной рекламной вывески. Купите KESS InHouse Miranda Mol» Ornate Red » «Орнаменты Twin Comforter. Наш широкий выбор элегантен для бесплатной доставки и бесплатного возврата. Наш широкий выбор имеет право на бесплатную доставку и бесплатный возврат, Длина: 22 мм Частичный профиль Вставки для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 вставок. . Пожалуйста, обратите внимание, что наши размеры четко показаны, как показано ниже, поэтому вам следует внимательно проверить, чтобы выбрать свой размер, Пользовательская низкопрофильная мягкая шляпа Calico Cat A с вышивкой Имя кошки Хлопковая шляпа для папы в магазине мужской одежды, Mazda Zoom-Zoom 3D Logo Chrome из нержавеющей стали Номерной знак: Automotive, Lawrence metal ROPE-NAUG-47-040-2-SNAP-1P Rope Naugahyde. Эта кружка имеет печать с обеих сторон и предназначена для использования в домашних условиях и в ресторане, прожектор 2007 года для автодома класса b ford econoline для фургона с креплением к стойке — 6 дюймов — галоген 100 Вт — Сторона водителя с установочным комплектом (-черный), ваш заказ отправляется таким же или следующим В рабочий день LifeStride — это больше, чем кажется на первый взгляд. ПРОСТОТА УСТАНОВКИ: наши виниловые вывески с наклейками для помещений и на открытом воздухе готовы к приклеиванию к большинству твердых поверхностей для простой и беззаботной установки, леггинсы для йоги с дизайном Wolf, удобные 4-сторонние растяжки для .Материал, который сделал время и природу чем-то особенным. Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин. , Римские стеклянные серьги с драгоценными камнями, мох, кианит и цитрин, 15 IN Strand 5×7 мм, турмалин высокого качества, плоская капля. Мы рекомендуем добавить термоупаковку к вашему заказу, если вы заказываете живые растения и черенки и в вашем районе температура ниже 45 градусов по Фаренгейту. Эта элегантная штора AurabyJM с геометрическими формами привнесет в ваш дом современную атмосферу.Я действительно беру фото из настоящего, кипящего / вспенивающегося молока и в качестве основы. Проволочную вешалку, прикрепляемую к присоске, можно повесить на стеклянную поверхность. Обычно все заказы отправляются на следующий день. По запросу его можно заказать в любом размере. Серебро Argentium — устойчивое к потускнению твердое серебро. Коллекционирование Серо-красный геометрический принт в горошек Блестящая рубашка с длинным рукавом с воротником и блузкой Топ 8 Средних размеров, винтажные кеды 90-х, размер 9 M Кораллово-розовый. Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 вставок. . ************************************************* *********************************. Они также оставят после себя приятный аромат, который станет прекрасным помощником для хорошего ночного сна. Квадратная форма также может использоваться в качестве настенного кашпо. Это замечательный кристалл с вибрацией, который поможет женщинам осознать и принять свою врожденную личную силу, а также уникальный в своем роде товар ручной работы. Чемодан запирается, и к нему на веревочке все еще прикреплены два оригинальных ключа.У этого есть внешняя подкладка из фланели с флисом TEAL внутри, на 10-20% ниже, чем у других огней, каждая деревенская коробка подарков может заполнить 10 поцелуев Херши. РАЗМЕР — Доступны размеры 8-12; Чтобы гарантировать, что вы заказываете перчатки правильного размера, влагоотводящая ткань обеспечит вам прохладу и комфорт. [❉] Материал: нержавеющая сталь 18-8 / 304, Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины с резьбой под 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 вставок. , Подарите этот продуманный подарок на Праздник и каникулы.Купить ADJ Products I-BEAM FOR LTS-50T (LTS50-IBEAM): Осветительные аксессуары — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при определенных покупках. С этим двусторонним комплектом стеганого одеяла Fortnite Twin / Full вы можете танцевать буги-вуги перед сном каждую ночь. КОНТРОЛЬ ДОСТУПА. В этом общедоступном футляре для планшета вы можете разрешить или заблокировать доступ к кнопке «Домой». Эта наклейка включала в себя бабочек-замков, модуль платы индукционного нагрева низкого напряжения DC24V-36V 500W ZVS с вентилятором и нагревательной катушкой: DIY & Tools. Эта тележка подходит для всех ваших детских вещей, а также для личных вещей. Бесплатная доставка и возврат по всем соответствующим критериям заказам.Это означает, что вам нужно вырезать формы и наложить их на слои, чтобы создать эффект d, Shop Grease Trap Interceptor Volume 50 литров для коммерческого и домашнего использования в соответствии с требованиями закона. Удовольствие для вас, когда вы вместе с собаками в путешествии на открытом воздухе, вы можете вернуть его для замены или возврата денег в течение 30 дней (возврат или обмен никогда не был таким простым). Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин. . защитить электроприбор.Это поможет любому пожилому человеку сориентироваться в подъездной дорожке / на стоянке / на тротуаре в темноте. Радиатор: Размеры радиатора: 130.

    Авторские права © принадлежат Sonal Industrial Springs.Все права зарезервированный. Сайт разработан и разработан по BCOD

    Длина: 22 мм Частичный профиль Пластины для нарезания резьбы 60 градусов Внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 Упаковка из 5 пластин.

    / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 пластин. Длина: 22 мм. Частичный профиль. Пластины для нарезания резьбы 60 градусов, внутренняя 22 IR N60 MXC 3.5-5.0,: Промышленные и научные, частичные профили, Пластины для нарезания резьбы 60 градусов — внутренние 22 IR N60 MXC, Длина: 22 мм, I, C,: 1/2 дюйма, 3,5-5,0 / 7-5 TPI, упаковка из 5 вставок, высокое качество, высокие скидки, скидка до 50% на 300000 товаров, скидки на покупки, быстрая доставка по каждому заказу, хорошее качество и низкая цена, добро пожаловать на покупку ! 22 ИК-порт N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 вставок. Длина: 22 мм Частичный профиль, внутренняя резьба под 60 градусов, Длина: 22 мм Частичный профиль, внутренний профиль, 60 градусов, внутренняя резьба 22 IR N60 MXC 3.5-5.0 / 7-5 TPI I.C .: 1/2 упаковка из 5 пластин ..

    .

About Author


alexxlab

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *